Grazzi talli żort nature.com. Il-verżjoni tal-browser li qed tuża għandha appoġġ limitat għas-CSS. Għall-aħjar esperjenza, nirrakkomandaw li tuża l-aħħar verżjoni tal-browser (jew li titfi l-modalità ta' kompatibilità fl-Internet Explorer). Barra minn hekk, biex niżguraw appoġġ kontinwu, dan is-sit mhux se jinkludi stili jew JavaScript.
Il-melamina hija kontaminant tal-ikel rikonoxxut li jista' jkun preżenti f'ċerti kategoriji ta' ikel kemm aċċidentalment kif ukoll intenzjonalment. L-għan ta' dan l-istudju kien li jivverifika l-iskoperta u l-kwantifikazzjoni tal-melamina fil-formula tat-trabi u t-trab tal-ħalib. Ġew analizzati total ta' 40 kampjun tal-ikel disponibbli kummerċjalment, inkluż formula tat-trabi u trab tal-ħalib, minn reġjuni differenti tal-Iran. Il-kontenut approssimattiv tal-melamina tal-kampjuni ġie determinat bl-użu ta' sistema ta' kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja-ultravjola (HPLC-UV). Kurva ta' kalibrazzjoni (R2 = 0.9925) inbniet għall-iskoperta tal-melamina fil-medda ta' 0.1–1.2 μg mL−1. Il-limiti ta' kwantifikazzjoni u skoperta kienu 1 μg mL−1 u 3 μg mL−1, rispettivament. Il-melamina ġiet ittestjata fil-formula tat-trabi u t-trab tal-ħalib u r-riżultati wrew li l-livelli ta' melamina fil-kampjuni tal-formula tat-trabi u t-trab tal-ħalib kienu 0.001–0.095 mg kg−1 u 0.001–0.004 mg kg−1, rispettivament. Dawn il-valuri huma konformi mal-leġiżlazzjoni tal-UE u l-Codex Alimentarius. Huwa importanti li wieħed jinnota li l-konsum ta’ dawn il-prodotti tal-ħalib b’kontenut imnaqqas ta’ melamina ma joħloqx riskju sinifikanti għas-saħħa tal-konsumatur. Dan huwa appoġġjat ukoll mir-riżultati tal-valutazzjoni tar-riskju.
Il-melamina hija kompost organiku bil-formula molekulari C3H6N6, derivat miċ-ċjanamid. Għandha solubilità baxxa ħafna fl-ilma u fiha madwar 66% nitroġenu. Il-melamina hija kompost industrijali użat ħafna b'firxa wiesgħa ta' użi leġittimi fil-produzzjoni ta' plastiks, fertilizzanti, u tagħmir għall-ipproċessar tal-ikel (inkluż l-ippakkjar tal-ikel u oġġetti tal-kċina)1,2. Il-melamina tintuża wkoll bħala trasportatur tal-mediċini għat-trattament ta' mard. Il-proporzjon għoli ta' nitroġenu fil-melamina jista' jwassal għal użu ħażin tal-kompost u biex il-proprjetajiet tal-molekuli tal-proteini jingħataw lill-ingredjenti tal-ikel3,4. Għalhekk, iż-żieda tal-melamina mal-prodotti tal-ikel, inklużi l-prodotti tal-ħalib, iżżid il-kontenut tan-nitroġenu. Għalhekk, ġie konkluż b'mod żbaljat li l-kontenut tal-proteini tal-ħalib kien ogħla milli kien fil-fatt.
Għal kull gramma ta’ melamina miżjuda, il-kontenut ta’ proteina fl-ikel jiżdied b’0.4%. Madankollu, il-melamina tinħall ħafna fl-ilma u tista’ tikkawża ħsara aktar serja. Iż-żieda ta’ 1.3 grammi ta’ melamina ma’ prodotti likwidi bħall-ħalib tista’ żżid il-kontenut ta’ proteina tal-ħalib bi 30%5,6. Għalkemm il-melamina tiżdied ma’ ikel tal-annimali u anke tal-bniedem biex iżżid il-kontenut ta’ proteina7, il-Kummissjoni Codex Alimentarius (CAC) u l-awtoritajiet nazzjonali ma approvawx il-melamina bħala addittiv tal-ikel u elenkawha bħala perikoluża jekk tinbela’, tinġibed man-nifs, jew tiġi assorbita mill-ġilda. Fl-2012, l-Aġenzija Internazzjonali għar-Riċerka dwar il-Kanċer tal-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa (WHO) elenkaw il-melamina bħala karċinoġenu tal-Klassi 2B għaliex tista’ tkun ta’ ħsara għas-saħħa tal-bniedem8. L-espożizzjoni fit-tul għall-melamina tista’ tikkawża kanċer jew ħsara fil-kliewi2. Il-melamina fl-ikel tista’ tikkumplessa mal-aċidu ċjanuriku biex tifforma kristalli sofor li ma jinħallux fl-ilma li jistgħu jikkawżaw ħsara lit-tessut tal-kliewi u tal-bużżieqa tal-awrina, kif ukoll kanċer fl-apparat urinarju u telf ta’ piż9,10. Jista’ jikkawża avvelenament akut mill-ikel u, f’konċentrazzjonijiet għoljin, mewt, speċjalment fit-trabi u t-tfal żgħar.11 L-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa (WHO) stabbilixxiet ukoll id-doża tollerabbli ta’ kuljum (TDI) tal-melamina għall-bnedmin għal 0.2 mg/kg piż tal-ġisem kuljum ibbażata fuq il-linji gwida tas-CAC.12 L-Amministrazzjoni tal-Ikel u d-Droga tal-Istati Uniti (US FDA) stabbilixxiet il-livell massimu ta’ residwu għall-melamina għal 1 mg/kg fil-formula tat-trabi u 2.5 mg/kg f’ikel ieħor.2,7 F’Settembru 2008, ġie rrappurtat li diversi manifatturi domestiċi tal-formula tat-trabi żiedu l-melamina mat-trab tal-ħalib biex iżidu l-kontenut tal-proteina tal-prodotti tagħhom, li rriżulta f’avvelenament mit-trab tal-ħalib u wassal għal inċident nazzjonali ta’ avvelenament mill-melamina li marad aktar minn 294,000 tifel u tifla u ddaħħlu l-isptar aktar minn 50,000. 13
It-treddigħ mhux dejjem ikun possibbli minħabba diversi fatturi bħad-diffikultajiet tal-ħajja urbana, mard tal-omm jew tat-tarbija, li jwassal għall-użu ta' formula għat-trabi biex jitimgħu lit-trabi. B'riżultat ta' dan, ġew stabbiliti fabbriki biex jipproduċu formula għat-trabi li hija kemm jista' jkun qrib il-ħalib tas-sider fil-kompożizzjoni14. Il-formula għat-trabi mibjugħa fis-suq ġeneralment tkun magħmula mill-ħalib tal-baqra u ġeneralment tkun magħmula b'taħlita speċjali ta' xaħmijiet, proteini, karboidrati, vitamini, minerali u komposti oħra. Sabiex tkun qrib il-ħalib tas-sider, il-kontenut ta' proteina u xaħam tal-formula jvarja, u skont it-tip ta' ħalib, huma msaħħa b'komposti bħal vitamini u minerali bħall-ħadid15. Peress li t-trabi huma grupp sensittiv u hemm riskju ta' avvelenament, is-sikurezza tal-konsum tat-trab tal-ħalib hija ta' importanza vitali għas-saħħa. Wara l-każ ta' avvelenament bil-melamina fost it-trabi Ċiniżi, pajjiżi madwar id-dinja taw attenzjoni mill-qrib lil din il-kwistjoni, u s-sensittività ta' dan il-qasam żdiedet ukoll. Għalhekk, huwa speċjalment importanti li jissaħħaħ il-kontroll tal-produzzjoni tal-formula għat-trabi sabiex tiġi protetta s-saħħa tat-trabi. Hemm diversi metodi biex tiġi skoperta l-melamina fl-ikel, inkluż kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC), elettroforesi, metodu sensorjali, spettrofotometrija u assay immunosorbenti marbut ma' enzimi ta' antiġen-antikorp16. Fl-2007, l-Amministrazzjoni tal-Ikel u d-Droga tal-Istati Uniti (FDA) żviluppat u ppubblikat metodu HPLC għad-determinazzjoni tal-melamina u l-aċidu ċjanuriku fl-ikel, li huwa l-aktar metodu effettiv biex jiġi determinat il-kontenut tal-melamina17.
Il-konċentrazzjonijiet tal-melamina fil-formula tat-trabi mkejla bl-użu ta’ teknika ġdida ta’ spettroskopija infra-aħmar varjaw minn 0.33 sa 0.96 milligrammi kull kilogramma (mg kg-1). 18 Studju fis-Sri Lanka sab li l-livelli tal-melamina fit-trab tal-ħalib sħiħ ivarjaw minn 0.39 sa 0.84 mg kg-1. Barra minn hekk, kampjuni importati tal-formula tat-trabi kien fihom l-ogħla livelli ta’ melamina, b’0.96 u 0.94 mg/kg, rispettivament. Dawn il-livelli huma taħt il-limitu regolatorju (1 mg/kg), iżda huwa meħtieġ programm ta’ monitoraġġ għas-sikurezza tal-konsumatur. 19
Diversi studji eżaminaw il-livelli ta’ melamina fil-formuli tat-trabi Iranjani. Madwar 65% tal-kampjuni kien fihom melamina, b’medja ta’ 0.73 mg/kg u massimu ta’ 3.63 mg/kg. Studju ieħor irrapporta li l-livell ta’ melamina fil-formula tat-trabi varja minn 0.35 sa 3.40 μg/kg, b’medja ta’ 1.38 μg/kg. B’mod ġenerali, il-preżenza u l-livell ta’ melamina fil-formuli tat-trabi Iranjani ġew ivvalutati f’diversi studji, b’xi kampjuni li fihom melamina li taqbeż il-limitu massimu stabbilit mill-awtoritajiet regolatorji (2.5 mg/kg/għalf).
Meta wieħed iqis il-konsum enormi dirett u indirett tat-trab tal-ħalib fl-industrija tal-ikel u l-importanza speċjali tal-formula tat-trabi fit-tmigħ tat-tfal, dan l-istudju kellu l-għan li jivvalida l-metodu ta' skoperta tal-melamina fit-trab tal-ħalib u l-formula tat-trabi. Fil-fatt, l-ewwel objettiv ta' dan l-istudju kien li jiżviluppa metodu kwantitattiv rapidu, sempliċi u preċiż għall-iskoperta tal-adulterazzjoni tal-melamina fil-formula tat-trabi u t-trab tal-ħalib bl-użu tal-kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) u skoperta ultravjola (UV); It-tieni nett, l-objettiv ta' dan l-istudju kien li jiddetermina l-kontenut tal-melamina fil-formula tat-trabi u t-trab tal-ħalib mibjugħ fis-suq Iranjan.
L-istrumenti użati għall-analiżi tal-melamina jvarjaw skont il-post tal-produzzjoni tal-ikel. Intuża metodu ta' analiżi HPLC-UV sensittiv u affidabbli biex jitkejlu r-residwi tal-melamina fil-ħalib u l-formula tat-trabi. Il-prodotti tal-ħalib fihom diversi proteini u xaħmijiet li jistgħu jinterferixxu mal-kejl tal-melamina. Għalhekk, kif innutat minn Sun et al. 22, hija meħtieġa strateġija ta' tindif xierqa u effettiva qabel l-analiżi strumentali. F'dan l-istudju, użajna filtri tas-siringi li jintremew. F'dan l-istudju, użajna kolonna C18 biex nisseparaw il-melamina fil-formula tat-trabi u t-trab tal-ħalib. Il-Figura 1 turi l-kromatogramma għad-detezzjoni tal-melamina. Barra minn hekk, l-irkupru tal-kampjuni li fihom 0.1–1.2 mg/kg ta' melamina varja minn 95% sa 109%, l-ekwazzjoni tar-rigressjoni kienet y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925), u l-valuri tad-devjazzjoni standard relattiva (RSD) varjaw minn 0.8 sa 2%. Id-dejta disponibbli tindika li l-metodu huwa affidabbli fil-medda ta' konċentrazzjoni studjata (Tabella 1). Il-limitu strumentali ta' skoperta (LOD) u l-limitu ta' kwantifikazzjoni (LOQ) tal-melamina kienu 1 μg mL−1 u 3 μg mL−1, rispettivament. Barra minn hekk, l-ispettru UV tal-melamina wera medda ta' assorbiment f'242 nm. Il-metodu ta' skoperta huwa sensittiv, affidabbli u preċiż. Dan il-metodu jista' jintuża għad-determinazzjoni ta' rutina tal-livell tal-melamina.
Riżultati simili ġew ippubblikati minn diversi awturi. Ġie żviluppat metodu ta' kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja-firxa ta' fotodijodi (HPLC) għall-analiżi tal-melamina fil-prodotti tal-ħalib. Il-limiti aktar baxxi ta' kwantifikazzjoni kienu 340 μg kg−1 għat-trab tal-ħalib u 280 μg kg−1 għall-formula tat-trabi f'240 nm. Filazzi et al. (2012) irrappurtaw li l-melamina ma nstabitx fil-formula tat-trabi permezz ta' HPLC. Madankollu, 8% tal-kampjuni tat-trab tal-ħalib kien fihom melamina f'livell ta' 0.505–0.86 mg/kg. Tittlemiet et al.23 wettqu studju simili u ddeterminaw li l-kontenut ta' melamina fil-formula tat-trabi (numru tal-kampjun: 72) permezz ta' kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja-spettrometrija tal-massa/MS (HPLC-MS/MS) kien ta' madwar 0.0431–0.346 mg kg−1. Fi studju mmexxi minn Venkatasamy et al. (2010), intuża approċċ ta’ kimika ekoloġika (mingħajr aċetonitrile) u kromatografija likwida ta’ prestazzjoni għolja b’fażi inversa (RP-HPLC) biex jiġi stmat il-melamina fil-formula tat-trabi u l-ħalib. Il-medda ta’ konċentrazzjoni tal-kampjun kienet minn 1.0 sa 80 g/mL u r-rispons kien lineari (r > 0.999). Il-metodu wera rkupri ta’ 97.2–101.2 fuq il-medda ta’ konċentrazzjoni ta’ 5–40 g/mL u r-riproduċibbiltà kienet inqas minn 1.0% devjazzjoni standard relattiva. Barra minn hekk, l-LOD u l-LOQ osservati kienu 0.1 g mL−1 u 0.2 g mL−124, rispettivament. Lutter et al. (2011) iddeterminaw il-kontaminazzjoni tal-melamina fil-ħalib tal-baqra u l-formula tat-trabi bbażata fuq il-ħalib bl-użu ta’ HPLC-UV. Il-konċentrazzjonijiet tal-melamina varjaw minn < 0.2 sa 2.52 mg kg−1. Il-medda dinamika lineari tal-metodu HPLC-UV kienet minn 0.05 sa 2.5 mg kg−1 għall-ħalib tal-baqra, minn 0.13 sa 6.25 mg kg−1 għall-formula tat-trabi bi frazzjoni tal-massa tal-proteina ta' <15%, u minn 0.25 sa 12.5 mg kg−1 għall-formula tat-trabi bi frazzjoni tal-massa tal-proteina ta' 15%. Ir-riżultati tal-LOD (u l-LOQ) kienu 0.03 mg kg−1 (0.09 mg kg−1) għall-ħalib tal-baqra, 0.06 mg kg−1 (0.18 mg kg−1) għall-formula tat-trabi bi <15% proteina, u 0.12 mg kg−1 (0.36 mg kg−1) għall-formula tat-trabi bi 15% proteina, b'proporzjon sinjal-ħoss ta' 3 u 1025 għal-LOD u l-LOQ, rispettivament. Diebes et al. (2012) investigaw il-livelli ta' melamina f'kampjuni ta' formula tat-trabi u trab tal-ħalib bl-użu tal-HPLC/DMD. Fil-formula tat-trabi, l-aktar livelli baxxi u għoljin kienu 9.49 mg kg−1 u 258 mg kg−1, rispettivament. Il-limitu ta' skoperta (LOD) kien 0.05 mg kg−1.
Javaid et al. irrappurtaw li r-residwi tal-melamina fil-formula tat-trabi kienu fil-medda ta’ 0.002–2 mg kg−1 permezz ta’ spettroskopija infra-ħamra bit-trasformazzjoni ta’ Fourier (FT-MIR) (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1). Rezai et al.27 ipproponew metodu HPLC-DDA (λ = 220 nm) biex jistmaw il-melamina u kisbu LOQ ta’ 0.08 μg mL−1 għat-trab tal-ħalib, li kien aktar baxx mil-livell miksub f’dan l-istudju. Sun et al. żviluppaw RP-HPLC-DAD għad-detezzjoni tal-melamina fil-ħalib likwidu permezz ta’ estrazzjoni tal-fażi solida (SPE). Huma kisbu LOD u LOQ ta’ 18 u 60 μg kg−128, rispettivament, li huwa aktar sensittiv mill-istudju attwali. Montesano et al. ikkonferma l-effettività tal-metodu HPLC-DMD għall-valutazzjoni tal-kontenut tal-melamina fis-supplimenti tal-proteini b'limitu ta' kwantifikazzjoni ta' 0.05–3 mg/kg, li kien inqas sensittiv mill-metodu użat f'dan l-istudju29.
Bla dubju, il-laboratorji analitiċi għandhom rwol importanti fil-protezzjoni tal-ambjent billi jimmonitorjaw is-sustanzi niġġiesa f'diversi kampjuni. Madankollu, l-użu ta' numru kbir ta' reaġenti u solventi waqt l-analiżi jista' jirriżulta fil-formazzjoni ta' residwi perikolużi. Għalhekk, il-kimika analitika ekoloġika (GAC) ġiet żviluppata fl-2000 biex tnaqqas jew telimina l-effetti negattivi tal-proċeduri analitiċi fuq l-operaturi u l-ambjent26. Metodi tradizzjonali ta' skoperta tal-melamina inklużi l-kromatografija, l-elettroforesi, l-elettroforesi kapillari, u l-analiżi immunosorbenti marbuta mal-enzimi (ELISA) intużaw biex jidentifikaw il-melamina. Madankollu, fost il-bosta metodi ta' skoperta, is-sensuri elettrokimiċi ġibdu ħafna attenzjoni minħabba s-sensittività eċċellenti tagħhom, is-selettività, il-ħin rapidu tal-analiżi, u l-karatteristiċi faċli għall-utent30,31. In-nanoteknoloġija ekoloġika tutilizza mogħdijiet bijoloġiċi biex tissintetizza nanomaterjali, li jistgħu jnaqqsu l-ġenerazzjoni ta' skart perikoluż u l-konsum tal-enerġija, u b'hekk jippromwovu l-implimentazzjoni ta' prattiki sostenibbli. Nanokomposti, pereżempju, magħmula minn materjali li ma jagħmlux ħsara lill-ambjent, jistgħu jintużaw f'bijosensuri biex jidentifikaw sustanzi bħall-melamina32,33,34.
L-istudju juri li l-mikroestrazzjoni f'fażi solida (SPME) tintuża b'mod effettiv minħabba l-effiċjenza enerġetika u s-sostenibbiltà ogħla tagħha meta mqabbla mal-metodi tradizzjonali ta' estrazzjoni. Il-kompatibbiltà ambjentali u l-effiċjenza enerġetika tal-SPME jagħmluha alternattiva eċċellenti għall-metodi tradizzjonali ta' estrazzjoni fil-kimika analitika u tipprovdi metodu aktar sostenibbli u effiċjenti għall-preparazzjoni tal-kampjuni35.
Fl-2013, Wu et al. żviluppaw bijosensur tar-reżonanza tal-plażmon tal-wiċċ (mini-SPR) li huwa sensittiv ħafna u selettiv li juża l-akkoppjar bejn l-antikorpi tal-melamina u l-anti-melamina biex jiskopri malajr il-melamina fil-formula tat-trabi bl-użu ta' immunoassay. Il-bijosensur SPR flimkien ma' immunoassay (bl-użu ta' albumina tas-serum bovin konjugata mal-melamina) hija teknoloġija faċli biex tintuża u bi prezz baxx b'limitu ta' skoperta ta' 0.02 μg mL-136 biss.
Nasiri u Abbasian użaw sensur portabbli ta' potenzjal għoli flimkien ma' kompożiti tal-ossidu tal-grafene-kitosan (GOCS) biex jidentifikaw il-melamina f'kampjuni kummerċjali37. Dan il-metodu wera selettività, preċiżjoni u rispons ultra-għoljin. Is-senser GOCS wera sensittività notevoli (239.1 μM−1), firxa lineari ta' 0.01 sa 200 μM, kostanti ta' affinità ta' 1.73 × 104, u LOD sa 10 nM. Barra minn hekk, studju mmexxi minn Chandrasekhar et al. fl-2024 adotta approċċ ekoloġiku u kosteffettiv. Huma użaw estratt tal-qoxra tal-papajja bħala aġent li jnaqqas biex jissintetizzaw nanopartiċelli tal-ossidu taż-żingu (ZnO-NPs) f'metodu ekoloġiku. Sussegwentement, ġiet żviluppata teknika unika ta' spettroskopija mikro-Raman għad-determinazzjoni tal-melamina fil-formula tat-trabi. ZnO-NPs derivati ​​minn skart agrikolu wrew potenzjal bħala għodda dijanjostika siewja u teknoloġija affidabbli u bi prezz baxx għall-monitoraġġ u l-iskoperta tal-melamina38.
Alizadeh et al. (2024) użaw pjattaforma ta' fluworexxenza b'qafas metall-organiku (MOF) sensittiv ħafna biex jiddeterminaw il-melamina fit-trab tal-ħalib. Il-medda lineari u l-limitu ta' skoperta aktar baxx tas-senser, determinati bl-użu ta' 3σ/S, kienu minn 40 sa 396.45 nM (ekwivalenti għal 25 μg kg−1 sa 0.25 mg kg−1) u 40 nM (ekwivalenti għal 25 μg kg−1), rispettivament. Din il-medda hija ferm taħt il-livelli massimi ta' residwi (MRLs) stabbiliti għall-identifikazzjoni tal-melamina fil-formula tat-trabi (1 mg kg−1) u kampjuni oħra ta' ikel/għalf (2.5 mg kg−1). Is-senser fluworexxenti (terbium (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) wera preċiżjoni ogħla u kapaċità ta' kejl aktar preċiża mill-HPLC39 fl-iskoperta tal-melamina fit-trab tal-ħalib. Il-bijosensuri u n-nanokomposti fil-kimika ekoloġika mhux biss itejbu l-kapaċitajiet ta' skoperta iżda wkoll jimminimizzaw il-perikli ambjentali f'konformità mal-prinċipji tal-iżvilupp sostenibbli.
Il-prinċipji tal-kimika ekoloġika ġew applikati għal diversi metodi għad-determinazzjoni tal-melamina. Approċċ wieħed huwa l-iżvilupp ta' metodu ta' mikroestrazzjoni f'fażi solida dispersiva ekoloġika bl-użu tal-polimeru polari naturali β-ċiklodextrin inkroċjat ma' aċidu ċitriku għall-estrazzjoni effiċjenti tal-melamina 40 minn kampjuni bħal formula tat-trabi u ilma sħun. Metodu ieħor juża r-reazzjoni ta' Mannich għad-determinazzjoni tal-melamina f'kampjuni tal-ħalib. Dan il-metodu huwa irħis, ma jagħmilx ħsara lill-ambjent, u preċiż ħafna b'firxa lineari ta' 0.1–2.5 ppm u limitu ta' skoperta baxx 41. Barra minn hekk, ġie żviluppat metodu kosteffettiv u ma jagħmilx ħsara lill-ambjent għad-determinazzjoni kwantitattiva tal-melamina fil-ħalib likwidu u l-formula tat-trabi bl-użu tal-ispettroskopija tat-trażmissjoni infra-aħmar tat-trasformazzjoni ta' Fourier b'eżattezza għolja u limiti ta' skoperta ta' 1 ppm u 3.5 ppm, rispettivament 42. Dawn il-metodi juru l-applikazzjoni tal-prinċipji tal-kimika ekoloġika għall-iżvilupp ta' metodi effiċjenti u sostenibbli għad-determinazzjoni tal-melamina.
Diversi studji pproponew metodi innovattivi għad-detezzjoni tal-melamina, bħall-użu ta' estrazzjoni f'fażi solida u kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC)43, kif ukoll kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja veloċi (HPLC), li ma teħtieġx trattament minn qabel kumpless jew reaġenti ta' pari ta' joni, u b'hekk tnaqqas l-ammont ta' skart kimiku44. Dawn il-metodi mhux biss jipprovdu riżultati preċiżi għad-determinazzjoni tal-melamina fil-prodotti tal-ħalib, iżda jikkonformaw ukoll mal-prinċipji tal-kimika ekoloġika, jimminimizzaw l-użu ta' kimiċi perikolużi u jnaqqsu l-impatt ambjentali ġenerali tal-proċess analitiku.
Erbgħin kampjun ta’ marki differenti ġew ittestjati fi tliet kopji, u r-riżultati huma ppreżentati fit-Tabella 2. Il-livelli ta’ melamina fil-kampjuni tal-formula tat-trabi u tat-trab tal-ħalib varjaw minn 0.001 sa 0.004 mg/kg u minn 0.001 sa 0.095 mg/kg, rispettivament. Ma ġew osservati l-ebda bidliet sinifikanti bejn it-tliet gruppi ta’ età tal-formula tat-trabi. Barra minn hekk, il-melamina ġiet skoperta fi 80% tat-trab tal-ħalib, iżda 65% tal-formuli tat-trabi kienu kkontaminati bil-melamina.
Il-kontenut ta' melamina fit-trab tal-ħalib industrijali kien ogħla milli fil-formula tat-trabi, u d-differenza kienet sinifikanti (p<0.05) (Figura 2).
Ir-riżultati miksuba kienu taħt il-limiti stabbiliti mill-FDA (taħt 1 u 2.5 mg/kg). Barra minn hekk, ir-riżultati huma konformi mal-limiti stabbiliti mis-CAC (2010) u l-EU45,46, jiġifieri l-limitu massimu permess huwa 1 mg kg-1 għall-formula tat-trabi u 2.5 mg kg-1 għall-prodotti tal-ħalib.
Skont studju tal-2023 minn Ghanati et al.47, il-kontenut ta' melamina f'tipi differenti ta' ħalib ippakkjat fl-Iran varja minn 50.7 sa 790 μg kg−1. Ir-riżultati tagħhom kienu taħt il-limitu permess tal-FDA. Ir-riżultati tagħna huma aktar baxxi minn dawk ta' Shoder et al.48 u Rima et al.49. Shoder et al. (2010) sabu li l-livelli ta' melamina fit-trab tal-ħalib (n=49) determinati minn ELISA varjaw minn 0.5 sa 5.5 mg/kg. Rima et al. analizzaw ir-residwi tal-melamina fit-trab tal-ħalib permezz ta' spettrofotometrija tal-fluworexxenza u sabu li l-kontenut ta' melamina fit-trab tal-ħalib kien ta' 0.72–5.76 mg/kg. Sar studju fil-Kanada fl-2011 biex jiġu mmonitorjati l-livelli ta' melamina fil-formula tat-trabi (n=94) bl-użu ta' kromatografija likwida (LC/MS). Il-konċentrazzjonijiet tal-melamina nstabu li kienu taħt il-limitu aċċettabbli (standard preliminari: 0.5 mg kg−1). Mhuwiex probabbli li l-livelli frodulenti ta’ melamina skoperti kienu tattika użata biex jiżdied il-kontenut tal-proteina. Madankollu, dan ma jistax jiġi spjegat bl-użu ta’ fertilizzanti, ir-rilokazzjoni tal-kontenut tal-kontenitur, jew fatturi simili. Barra minn hekk, is-sors tal-melamina fit-trab tal-ħalib importat fil-Kanada ma ġiex żvelat50.
Hassani et al. kejlu l-kontenut ta’ melamina fit-trab tal-ħalib u l-ħalib likwidu fis-suq Iranjan fl-2013 u sabu riżultati simili. Ir-riżultati wrew li ħlief għal marka waħda ta’ trab tal-ħalib u ħalib likwidu, il-kampjuni l-oħra kollha kienu kkontaminati bil-melamina, b’livelli li jvarjaw minn 1.50 sa 30.32 μg g−1 fit-trab tal-ħalib u minn 0.11 sa 1.48 μg ml−1 fil-ħalib. Ta’ min jinnota li l-aċidu ċjanuriku ma nstab fl-ebda wieħed mill-kampjuni, u dan naqqas il-possibbiltà ta’ avvelenament bil-melamina għall-konsumaturi. 51 Studji preċedenti vvalutaw il-konċentrazzjoni tal-melamina fi prodotti taċ-ċikkulata li fihom trab tal-ħalib. Madwar 94% tal-kampjuni importati u 77% tal-kampjuni Iranjani kien fihom melamina. Il-livelli ta’ melamina fil-kampjuni importati varjaw minn 0.032 sa 2.692 mg/kg, filwaqt li dawk fil-kampjuni Iranjani varjaw minn 0.013 sa 2.600 mg/kg. B’mod ġenerali, il-melamina nstabet f’85% tal-kampjuni, iżda marka speċifika waħda biss kellha livelli ’l fuq mil-limitu permess.44 Tittlemier et al. irrappurtaw livelli ta’ melamina fit-trab tal-ħalib li jvarjaw minn 0.00528 sa 0.0122 mg/kg.
It-Tabella 3 tiġbor fil-qosor ir-riżultati tal-valutazzjoni tar-riskju għat-tliet gruppi ta' età. Ir-riskju kien inqas minn 1 fil-gruppi ta' età kollha. Għalhekk, m'hemm l-ebda riskju għas-saħħa mhux karċinoġeniku mill-melamina fil-formula tat-trabi.
Livelli aktar baxxi ta’ kontaminazzjoni fil-prodotti tal-ħalib jistgħu jkunu dovuti għal kontaminazzjoni mhux intenzjonata waqt il-preparazzjoni, filwaqt li livelli ogħla jistgħu jkunu dovuti għal żidiet intenzjonali. Barra minn hekk, ir-riskju ġenerali għas-saħħa tal-bniedem mill-konsum ta’ prodotti tal-ħalib b’livelli baxxi ta’ melamina huwa kkunsidrat baxx. Jista’ jiġi konkluż li l-konsum ta’ prodotti li fihom livelli daqshekk baxxi ta’ melamina ma joħloq l-ebda riskju għas-saħħa tal-konsumatur52.
Meta wieħed iqis l-importanza tal-ġestjoni tas-sikurezza tal-ikel fl-industrija tal-ħalib, speċjalment f'termini ta' protezzjoni tas-saħħa pubblika, huwa ta' importanza kbira li jiġi żviluppat u vvalidat metodu għall-valutazzjoni u t-tqabbil tal-livelli u r-residwi tal-melamina fit-trab tal-ħalib u l-formula tat-trabi. Ġie żviluppat metodu spettrofotometriku HPLC-UV sempliċi u preċiż għad-determinazzjoni tal-melamina fil-formula tat-trabi u t-trab tal-ħalib. Il-metodu ġie vvalidat biex tiġi żgurata l-affidabbiltà u l-eżattezza tiegħu. Il-limiti ta' skoperta u kwantifikazzjoni tal-metodu ntwerew li huma sensittivi biżżejjed biex jitkejlu l-livelli ta' melamina fil-formula tat-trabi u t-trab tal-ħalib. Skont id-dejta tagħna, il-melamina ġiet skoperta fil-biċċa l-kbira tal-kampjuni Iranjani. Il-livelli kollha ta' melamina skoperti kienu taħt il-limiti massimi permissibbli stabbiliti mis-CAC, li jindika li l-konsum ta' dawn it-tipi ta' prodotti tal-ħalib ma joħloqx riskju għas-saħħa tal-bniedem.
Ir-reaġenti kimiċi kollha użati kienu ta' grad analitiku: melamina (2,4,6-triamino-1,3,5-triazine) 99% pura (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO); aċetonitrile ta' grad HPLC (Merck, Darmstadt, il-Ġermanja); ilma ultrapur (Millipore, Morfheim, Franza). Filtri tas-siringi li jintremew (Chromafil Xtra PVDF-45/25, daqs tal-pori 0.45 μm, dijametru tal-membrana 25 mm) (Macherey-Nagel, Düren, il-Ġermanja).
Intużaw banju ultrasoniku (Elma, il-Ġermanja), ċentrifuga (Beckman Coulter, Krefeld, il-Ġermanja) u HPLC (KNAUER, il-Ġermanja) biex jippreparaw il-kampjuni.
Intuża kromatografu likwidu ta' prestazzjoni għolja (KNAUER, il-Ġermanja) mgħammar b'ditekter UV. Il-kundizzjonijiet tal-analiżi HPLC kienu kif ġej: intużat sistema UHPLC Ultimate mgħammra b'kolonna analitika ODS-3 C18 (4.6 mm × 250 mm, daqs tal-partiċelli 5 μm) (MZ, il-Ġermanja). L-eluwent HPLC (fażi mobbli) kien taħlita TFA/metanol (450:50 mL) b'rata ta' fluss ta' 1 mL min-1. It-tul tal-mewġa tad-detezzjoni kien ta' 242 nm. Il-volum tal-injezzjoni kien ta' 100 μL, it-temperatura tal-kolonna kienet ta' 20 °C. Peress li l-ħin ta' żamma tal-mediċina huwa twil (15-il minuta), l-injezzjoni li jmiss għandha ssir wara 25 minuta. Il-melamina ġiet identifikata billi tqabbel il-ħin ta' żamma u l-quċċata tal-ispettru UV tal-istandards tal-melamina.
Soluzzjoni standard ta' melamina (10 μg/mL) ġiet ippreparata bl-użu tal-ilma u maħżuna fi friġġ (4 °C) 'il bogħod mid-dawl. Iddilwixxi s-soluzzjoni stokk mal-fażi mobbli u pprepara soluzzjonijiet standard tax-xogħol. Kull soluzzjoni standard ġiet injettata fl-HPLC 7 darbiet. L-ekwazzjoni tal-kalibrazzjoni 10 ġiet ikkalkulata permezz ta' analiżi ta' rigressjoni tal-erja tal-quċċata ddeterminata u l-konċentrazzjoni ddeterminata.
Trab tal-ħalib tal-baqra disponibbli kummerċjalment (20 kampjun) u kampjuni ta’ marki differenti ta’ formula għat-trabi bbażata fuq il-ħalib tal-baqra (20 kampjun) inxtraw minn supermarkets u spiżeriji lokali fl-Iran għat-tmigħ ta’ trabi ta’ gruppi ta’ etajiet differenti (0–6 xhur, 6–12-il xahar, u >12-il xahar) u nħażnu f’temperatura refriġerata (4 °C) sakemm jiġu analizzati. Imbagħad, 1 ± 0.01 g ta’ trab tal-ħalib omoġenizzat ġie miżun u mħallat ma’ aċetonitrile:ilma (50:50, v/v; 5 mL). It-taħlita tħawdet għal minuta, imbagħad ġiet sonikata f’banju ultrasoniku għal 30 minuta, u finalment imħawwda għal minuta. It-taħlita mbagħad ġiet ċentrifugata b’9000 × g għal 10 minuti f’temperatura tal-kamra u s-supernatant ġie ffiltrat f’kunjett ta’ awtosampler ta’ 2 ml bl-użu ta’ filtru tas-siringa ta’ 0.45 μm. Il-filtrat (250 μl) imbagħad tħallat ma' ilma (750 μl) u ġie injettat fis-sistema HPLC10,42.
Biex nivvalidaw il-metodu, iddeterminajna l-irkupru, l-eżattezza, il-limitu ta' skoperta (LOD), il-limitu ta' kwantifikazzjoni (LOQ), u l-preċiżjoni taħt kundizzjonijiet ottimali. L-LOD ġie definit bħala l-kontenut tal-kampjun b'għoli tal-quċċata tliet darbiet il-livell tal-ħoss bażi. Min-naħa l-oħra, il-kontenut tal-kampjun b'għoli tal-quċċata 10 darbiet il-proporzjon sinjal-ħoss ġie definit bħala l-LOQ.
Ir-rispons tal-apparat ġie determinat bl-użu ta' kurva ta' kalibrazzjoni li tikkonsisti f'seba' punti tad-dejta. Intużaw kontenuti differenti ta' melamina (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1 u 1.2). Ġiet determinata l-linearità tal-proċedura tal-kalkolu tal-melamina. Barra minn hekk, diversi livelli differenti ta' melamina ġew miżjuda mal-kampjuni vojta. Il-kurva ta' kalibrazzjoni nbniet billi ġew injettati kontinwament 0.1–1.2 μg mL−1 ta' soluzzjoni standard ta' melamina f'kampjuni ta' formula għat-trabi u ħalib tat-trab u l-R2 tagħha = 0.9925. L-eżattezza ġiet ivvalutata mir-ripetibbiltà u r-riproduċibbiltà tal-proċedura u nkisbet billi ġew injettati kampjuni fl-ewwel jum u fit-tliet ijiem sussegwenti (fi tliet kopji). Ir-ripetibbiltà tal-metodu ġiet ivvalutata billi ġie kkalkulat l-RSD % għal tliet konċentrazzjonijiet differenti ta' melamina miżjuda. Saru studji ta' rkupru biex tiġi ddeterminata l-preċiżjoni. Il-grad ta' rkupru bil-metodu ta' estrazzjoni ġie kkalkulat fi tliet livelli ta' konċentrazzjoni ta' melamina (0.1, 1.2, 2) f'kampjuni ta' formula għat-trabi u ħalib niexef9,11,15.
Il-konsum stmat ta' kuljum (EDI) ġie determinat bl-użu tal-formula li ġejja: EDI = Ci × Cc/BW.
Fejn Ci huwa l-kontenut medju ta' melamina, Cc huwa l-konsum tal-ħalib u BW huwa l-piż medju tat-tfal.
L-analiżi tad-dejta twettqet bl-użu tal-SPSS 24. In-normalità ġiet ittestjata bl-użu tat-test Kolmogorov-Smirnov; id-dejta kollha kienet testijiet mhux parametriċi (p = 0). Għalhekk, it-test Kruskal-Wallis u t-test Mann-Whitney intużaw biex jiddeterminaw differenzi sinifikanti bejn il-gruppi.
Ingelfinger, Jr. Il-melamina u l-impatt tagħha fuq il-kontaminazzjoni globali tal-ikel. New England Journal of Medicine 359(26), 2745–2748 (2008).
Lynch, RA, et al. Effett tal-pH fuq il-migrazzjoni tal-melamina fl-iskutelli tat-tfal. International Journal of Food Contamination, 2, 1–8 (2015).
Barrett, MP u Gilbert, IH Immirar ta' komposti tossiċi lejn l-intern tat-tripanosomi. Progress in Parasitology 63, 125–183 (2006).
Nirman, MF, et al. Evalwazzjoni in vitro u in vivo tad-dendrimeri tal-melamina bħala vetturi għall-kunsinna tal-mediċini. International Journal of Pharmacy, 281(1–2), 129–132(2004).
Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa. Laqgħat tal-Esperti 1–4 biex jirrevedu l-aspetti tossikoloġiċi tal-melamina u l-aċidu ċjanuriku (2008).
Howe, AK-C., Kwan, TH u Lee, PK-T. It-tossiċità tal-melamina u l-kliewi. Ġurnal tas-Soċjetà Amerikana tan-Nefroloġija 20(2), 245–250 (2009).
Ozturk, S. u Demir, N. Żvilupp ta' assorbent IMAC ġdid għall-identifikazzjoni tal-melamina fi prodotti tal-ħalib permezz ta' kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC). Journal of Food Synthesis and Analysis 100, 103931 (2021).
Chansuvarn, V., Panic, S. u Imim, A. Determinazzjoni spettrofotometrika sempliċi tal-melamina fil-ħalib likwidu bbażata fuq ir-reazzjoni ħadra ta' Mannich. Spectrochem. Acta Part A Mol. Biomol. Spectrosc. 113, 154–158 (2013).
Deabes, M. u El-Habib, R. Determinazzjoni tal-melamina fil-formula tat-trabi, trab tal-ħalib u kampjuni tal-pangasius permezz ta' kromatografija HPLC/dijagramma. Ġurnal tat-Tossikoloġija Analitika Ambjentali, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
Skinner, KG, Thomas, JD, u Osterloh, JD Tossiċità tal-melamina. Ġurnal tat-Tossikoloġija Medika, 6, 50–55 (2010).
Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa (WHO), Aspetti tossikoloġiċi u tas-saħħa tal-melamina u l-aċidu ċjanuriku: Rapport ta' laqgħa kollaborattiva ta' esperti WHO/FAO appoġġjata minn Health Canada, Ottawa, il-Kanada, 1-4 ta' Diċembru 2008 (2009).
Korma, SA, et al. Studju komparattiv tal-kompożizzjoni tal-lipidi u l-kwalità tat-trab tal-formula tat-trabi li fih lipidi strutturali funzjonali ġodda u formula kummerċjali tat-trabi. European Food Research and Technology 246, 2569–2586 (2020).
El-Waseef, M. u Hashem, H. Titjib tal-valur nutrittiv, l-attributi tal-kwalità u l-ħajja fuq l-ixkaffa tal-formula tat-trabi bl-użu taż-żejt tal-palm. Middle East Journal of Agricultural Research 6, 274–281 (2017).
Yin, W., et al. Produzzjoni ta' antikorpi monoklonali kontra l-melamina u żvilupp ta' metodu ELISA kompetittiv indirett għad-detezzjoni tal-melamina fil-ħalib nej, ħalib niexef, u għalf tal-annimali. Ġurnal tal-Kimika Agrikola u tal-Ikel 58(14), 8152–8157 (2010).