Dan l-artiklu huwa parti mit-tema tar-riċerka “L-użu antimikrobjali, ir-reżistenza antimikrobjali u l-mikrobijoma tal-annimali tal-ikel”. Ara t-13-il artiklu kollha
L-aċidi organiċi għadhom fid-domanda għolja bħala addittivi għall-għalf tal-annimali. Sal-lum, l-enfasi kienet fuq is-sikurezza tal-ikel, b'mod partikolari t-tnaqqis tal-inċidenza ta' patoġeni li jinġarru mill-ikel fit-tjur u annimali oħra. Diversi aċidi organiċi bħalissa qed jiġu studjati jew diġà qed jintużaw kummerċjalment. Fost il-ħafna aċidi organiċi li ġew studjati b'mod estensiv, l-aċidu formiku huwa wieħed minnhom. L-aċidu formiku jiżdied mad-dieti tat-tjur biex jillimita l-preżenza ta' Salmonella u patoġeni oħra li jinġarru mill-ikel fl-għalf u fil-passaġġ gastrointestinali wara l-inġestjoni. Hekk kif il-fehim tal-effikaċja u l-impatt tal-aċidu formiku fuq l-ospitant u l-patoġeni li jinġarru mill-ikel jikber, qed isir ċar li l-preżenza tal-aċidu formiku tista' twassal għal mogħdijiet speċifiċi fis-Salmonella. Din ir-rispons jista' jsir aktar kumpless meta l-aċidu formiku jidħol fil-passaġġ gastrointestinali u jinteraġixxi mhux biss mas-Salmonella li diġà qed tikkolonizza l-passaġġ gastrointestinali iżda wkoll mal-flora mikrobjali tal-imsaren stess. Ir-reviżjoni se teżamina r-riżultati attwali u l-prospetti għal aktar riċerka dwar il-mikrobijoma tat-tjur u l-għalf ittrattat bl-aċidu formiku.
Kemm fil-produzzjoni tal-bhejjem kif ukoll tat-tjur, l-isfida hija li jiġu żviluppati strateġiji ta' ġestjoni li jottimizzaw it-tkabbir u l-produttività filwaqt li jillimitaw ir-riskji tas-sikurezza tal-ikel. Storikament, l-għoti ta' antibijotiċi f'konċentrazzjonijiet subterapewtiċi tejbet is-saħħa, il-benesseri u l-produttività tal-annimali (1–3). Mill-perspettiva tal-mekkaniżmu ta' azzjoni, ġie propost li l-antibijotiċi amministrati f'konċentrazzjonijiet subinibitorji jimmedjaw ir-risponsi tal-ospitant billi jimmodulaw il-flora gastrointestinali (GI) u, min-naħa tagħhom, l-interazzjonijiet tagħhom mal-ospitant (3). Madankollu, tħassib kontinwu dwar it-tixrid potenzjali ta' patoġeni reżistenti għall-antibijotiċi li jinġarru mill-ikel u l-assoċjazzjoni potenzjali tagħhom ma' infezzjonijiet reżistenti għall-antibijotiċi fil-bnedmin wasslu għall-irtirar gradwali tal-użu tal-antibijotiċi fl-annimali tal-ikel (4–8). Għalhekk, l-iżvilupp ta' addittivi tal-għalf u sustanzi li jtejbu li jissodisfaw mill-inqas xi wħud minn dawn ir-rekwiżiti (saħħa, benesseri u produttività mtejba tal-annimali) huwa ta' interess kbir kemm mill-perspettiva tar-riċerka akkademika kif ukoll mill-perspettiva tal-iżvilupp kummerċjali (5, 9). Varjetà ta' addittivi kummerċjali tal-għalf daħlu fis-suq tal-ikel tal-annimali, inklużi probijotiċi, prebijotiċi, żjut essenzjali u komposti relatati minn diversi sorsi tal-pjanti, u kimiċi bħal aldeidi (10–14). Addittivi kummerċjali oħra tal-għalf li jintużaw b'mod komuni fit-tjur jinkludu batterjofaġi, ossidu taż-żingu, enzimi eżoġeni, prodotti ta' esklużjoni kompetittiva, u komposti aċidużi (15, 16).
Fost l-addittivi kimiċi tal-għalf eżistenti, l-aldeidi u l-aċidi organiċi storikament kienu l-aktar komposti studjati u użati (12, 17–21). L-aċidi organiċi, partikolarment l-aċidi grassi b'katina qasira (SCFAs), huma antagonisti magħrufa sew tal-batterji patoġeniċi. Dawn l-aċidi organiċi jintużaw bħala addittivi tal-għalf mhux biss biex jillimitaw il-preżenza ta' patoġeni fil-matriċi tal-għalf iżda wkoll biex jeżerċitaw effetti attivi fuq il-funzjoni gastrointestinali (17, 20–24). Barra minn hekk, l-SCFAs huma prodotti permezz tal-fermentazzjoni mill-flora intestinali fit-tratt diġestiv u huwa maħsub li għandhom rwol mekkanistiku fil-kapaċità ta' xi probijotiċi u prebijotiċi li jikkontrobattu l-patoġeni inġeriti fit-tratt gastrointestinali (21, 23, 25).
Matul is-snin, diversi aċidi grassi b'katina qasira (SCFAs) ġibdu ħafna attenzjoni bħala addittivi tal-għalf. B'mod partikolari, il-propjonat, il-butirat, u l-format kienu s-suġġett ta' bosta studji u applikazzjonijiet kummerċjali (17, 20, 21, 23, 24, 26). Filwaqt li studji bikrija ffokaw fuq il-kontroll ta' patoġeni li jinġarru mill-ikel fl-għalf tal-annimali u tat-tjur, studji aktar reċenti biddlu l-attenzjoni tagħhom għat-titjib ġenerali tal-prestazzjoni tal-annimali u s-saħħa gastrointestinali (20, 21, 24). L-aċetat, il-propjonat, u l-butirat ġibdu ħafna attenzjoni bħala addittivi tal-għalf b'aċidu organiku, li fosthom l-aċidu formiku huwa wkoll kandidat promettenti (21, 23). Ingħatat ħafna attenzjoni lill-aspetti tas-sikurezza tal-ikel tal-aċidu formiku, b'mod partikolari t-tnaqqis tal-inċidenza ta' patoġeni li jinġarru mill-ikel fl-għalf tal-bhejjem. Madankollu, qed jiġu kkunsidrati wkoll użi oħra possibbli. L-għan ġenerali ta' din ir-reviżjoni huwa li teżamina l-istorja u l-istatus attwali tal-aċidu formiku bħala sustanza li ttejjeb l-għalf tal-bhejjem (Figura 1). F'dan l-istudju, se neżaminaw il-mekkaniżmu antibatteriku tal-aċidu formiku. Barra minn hekk, se nagħtu ħarsa aktar mill-qrib lejn l-effetti tiegħu fuq il-bhejjem u t-tjur u niddiskutu metodi possibbli biex intejbu l-effettività tiegħu.
Fig. 1. Mappa mentali tas-suġġetti koperti f'din ir-reviżjoni. B'mod partikolari, l-objettivi ġenerali li ġejjin kienu ffukati fuq: li jiddeskrivu l-istorja u l-istatus attwali tal-aċidu formiku bħala sustanza li ttejjeb l-għalf tal-bhejjem, il-mekkaniżmi antimikrobiċi tal-aċidu formiku u l-impatt tal-użu tiegħu fuq is-saħħa tal-annimali u tat-tjur, u metodi potenzjali biex titjieb l-effikaċja.
Il-produzzjoni tal-għalf għall-bhejjem u t-tjur hija operazzjoni kumplessa li tinvolvi diversi passi, inkluż l-ipproċessar fiżiku tal-qamħ (eż., tħin biex jitnaqqas id-daqs tal-partiċelli), l-ipproċessar termali għall-pelleting, u ż-żieda ta’ diversi nutrijenti mad-dieta skont il-bżonnijiet nutrizzjonali speċifiċi tal-annimal (27). Minħabba din il-kumplessità, mhuwiex sorprendenti li l-ipproċessar tal-għalf jesponi l-qamħ għal varjetà ta’ fatturi ambjentali qabel ma jasal fil-mitħna tal-għalf, waqt it-tħin, u sussegwentement waqt it-trasport u l-għalf f’razzjonijiet ta’ għalf kompost (9, 21, 28). Għalhekk, matul is-snin, ġie identifikat grupp divers ħafna ta’ mikro-organiżmi fl-għalf, inklużi mhux biss batterji iżda wkoll batterjofaġi, fungi, u ħmira (9, 21, 28–31). Xi wħud minn dawn il-kontaminanti, bħal ċerti fungi, jistgħu jipproduċu mikotossini li joħolqu riskji għas-saħħa tal-annimali (32–35).
Il-popolazzjonijiet batteriċi jistgħu jkunu relattivament diversi u jiddependu sa ċertu punt fuq il-metodi rispettivi użati għall-iżolament u l-identifikazzjoni tal-mikroorganiżmi kif ukoll is-sors tal-kampjun. Pereżempju, il-profil tal-kompożizzjoni mikrobjali jista' jvarja qabel it-trattament bis-sħana assoċjat mal-pelleting (36). Għalkemm il-metodi klassiċi tal-kultura u tal-kisi fuq pjanċi pprovdew xi informazzjoni, l-applikazzjoni reċenti tal-metodu tas-sekwenzar tal-ġenerazzjoni li jmiss (NGS) ibbażat fuq il-ġene 16S rRNA pprovdiet valutazzjoni aktar komprensiva tal-komunità tal-mikrobijoma tal-għalf (9). Meta Solanki et al. (37) eżaminaw il-mikrobijoma batterjali tal-qmuħ maħżuna għal perjodu ta' żmien fil-preżenza tal-fosfina, fumigant għall-kontroll tal-insetti, sabu li l-mikrobijoma kienet aktar diversa wara l-ħsad u wara 3 xhur ta' ħażna. Barra minn hekk, Solanki et al. (37) (37) urew li Proteobacteria, Firmicutes, Actinobacteria, Bacteroidetes, u Planctomyces kienu l-phyla dominanti fil-qmuħ tal-qamħ, Bacillus, Erwinia, u Pseudomonas kienu l-ġeneri dominanti, u Enterobacteriaceae kienu jikkostitwixxu proporzjon żgħir. Abbażi ta' paraguni tassonomiċi, huma kkonkludew li l-fumigazzjoni bil-fosfina biddlet b'mod sinifikanti l-popolazzjonijiet batteriċi iżda ma affettwatx id-diversità fungali.
Solanki et al. (37) urew li s-sorsi tal-għalf jistgħu jkun fihom ukoll patoġeni li jinġarru mill-ikel li jistgħu jikkawżaw problemi ta’ saħħa pubblika bbażati fuq l-iskoperta ta’ Enterobacteriaceae fil-mikrobijoma. Patoġeni li jinġarru mill-ikel bħal Clostridium perfringens, Clostridium botulinum, Salmonella, Campylobacter, Escherichia coli O157:H7, u Listeria monocytogenes ġew assoċjati mal-għalf tal-annimali u s-silage (9, 31, 38). Il-persistenza ta’ patoġeni oħra li jinġarru mill-ikel fl-għalf tal-annimali u tat-tjur bħalissa mhix magħrufa. Ge et al. (39) skrinjaw aktar minn 200 ingredjent tal-għalf tal-annimali u iżolaw Salmonella, E. coli, u Enterococci, iżda ma skoprewx E. coli O157:H7 jew Campylobacter. Madankollu, matriċi bħall-għalf niexef jistgħu jservu bħala sors ta’ E. coli patoġeniku. Fit-traċċar tas-sors ta’ tifqigħa tal-2016 tas-serogruppi O121 u O26 ta’ Escherichia coli li jipproduċu t-tossina Shiga (STEC) assoċjati ma’ mard uman, Crowe et al. (40) użaw sekwenzar tal-ġenoma sħiħ biex iqabblu iżolati kliniċi ma’ iżolati miksuba minn prodotti tal-ikel. Abbażi ta’ dan it-tqabbil, huma kkonkludew li s-sors probabbli kien dqiq tal-qamħ nej b’umdità baxxa minn imtieħen tad-dqiq. Il-kontenut baxx ta’ umdità tad-dqiq tal-qamħ jissuġġerixxi li l-STEC jista’ jgħix ukoll fl-għalf tal-annimali b’umdità baxxa. Madankollu, kif jinnotaw Crowe et al. (40), l-iżolament tal-STEC mill-kampjuni tad-dqiq huwa diffiċli u jeħtieġ metodi ta’ separazzjoni immunomanjetika biex jiġu rkuprati numru suffiċjenti ta’ ċelloli batteriċi. Proċessi dijanjostiċi simili jistgħu wkoll jikkomplikaw l-iskoperta u l-iżolament ta’ patoġeni rari li jinġarru mill-ikel fl-għalf tal-annimali. Id-diffikultà fl-iskoperta tista’ tkun ukoll dovuta għall-persistenza twila ta’ dawn il-patoġeni f’matriċi b’umdità baxxa. Forghani et al. (41) wera li d-dqiq tal-qamħ maħżun f'temperatura tal-kamra u inokulat b'taħlita ta' serogruppi O45, O121, u O145 ta' Escherichia coli enteroemorraġiku (EHEC) u Salmonella (S. Typhimurium, S. Agona, S. Enteritidis, u S. Anatum) kien kwantifikabbli fi 84 u 112-il jum u xorta waħda ditektabbli fi 24 u 52 ġimgħa.
Storikament, Campylobacter qatt ma ġie iżolat mill-għalf tal-annimali u tat-tjur permezz ta' metodi ta' kultura tradizzjonali (38, 39), għalkemm Campylobacter jista' jiġi iżolat faċilment mill-passaġġ gastrointestinali tat-tjur u l-prodotti tat-tjur (42, 43). Madankollu, l-għalf għad għandu l-vantaġġi tiegħu bħala sors potenzjali. Pereżempju, Alves et al. (44) urew li l-inokulazzjoni tal-għalf tat-tiġieġ imħammen b'C. jejuni u l-ħażna sussegwenti tal-għalf f'żewġ temperaturi differenti għal 3 jew 5 ijiem irriżultaw fl-irkupru ta' C. jejuni vijabbli u, f'xi każijiet, anke fil-proliferazzjoni tagħhom. Huma kkonkludew li C. jejuni ċertament jista' jgħix fl-għalf tat-tjur u, għalhekk, jista' jkun sors potenzjali ta' infezzjoni għat-tiġieġ.
Il-kontaminazzjoni tas-Salmonella fl-għalf tal-annimali u tat-tjur irċeviet ħafna attenzjoni fil-passat u tibqa' fokus ta' sforzi kontinwi biex jiġu żviluppati metodi ta' skoperta speċifikament applikabbli għall-għalf u biex jinstabu miżuri ta' kontroll aktar effettivi (12, 26, 30, 45–53). Matul is-snin, ħafna studji eżaminaw l-iżolament u l-karatterizzazzjoni tas-Salmonella f'diversi stabbilimenti tal-għalf u mtieħen tal-għalf (38, 39, 54–61). B'mod ġenerali, dawn l-istudji jindikaw li s-Salmonella tista' tiġi iżolata minn varjetà ta' ingredjenti tal-għalf, sorsi ta' għalf, tipi ta' għalf, u operazzjonijiet tal-manifattura tal-għalf. Ir-rati ta' prevalenza u s-serotipi predominanti tas-Salmonella iżolati varjaw ukoll. Pereżempju, Li et al. (57) ikkonfermaw il-preżenza ta' Salmonella spp. Din ġiet skoperta fi 12.5% ​​​​tal-2058 kampjun miġbura minn għalf komplut tal-annimali, ingredjenti tal-għalf, ikel għall-annimali domestiċi, premjijiet għall-annimali domestiċi, u supplimenti għall-annimali domestiċi matul il-perjodu ta' ġbir tad-dejta mill-2002 sal-2009. Barra minn hekk, l-aktar serotipi komuni skoperti fit-12.5% ​​​​tal-kampjuni tas-Salmonella li ttestjaw pożittivi kienu S. Senftenberg u S. Montevideo (57). Fi studju dwar ikel lest biex jittiekel u prodotti sekondarji tal-għalf tal-annimali f'Texas, Hsieh et al. (58) irrappurtaw li l-ogħla prevalenza ta' Salmonella kienet fil-ħut mitħun, segwit minn proteini tal-annimali, b'S. Mbanka u S. Montevideo bħala l-aktar serotipi komuni. L-imtieħen tal-għalf jippreżentaw ukoll diversi punti potenzjali ta' kontaminazzjoni tal-għalf waqt it-taħlit u ż-żieda tal-ingredjenti (9, 56, 61). Magossi et al. (61) setgħu juru li jistgħu jseħħu punti multipli ta' kontaminazzjoni waqt il-produzzjoni tal-għalf fl-Istati Uniti. Fil-fatt, Magossi et al. (61) sabu mill-inqas kultura waħda pożittiva ta' Salmonella fi 11-il imtieħen tal-għalf (total ta' 12-il post ta' teħid ta' kampjuni) fi tmien stati fl-Istati Uniti. Minħabba l-potenzjal ta' kontaminazzjoni mis-Salmonella waqt l-immaniġġjar tal-għalf, it-trasport, u t-tmigħ ta' kuljum, mhux sorprendenti li qed isiru sforzi sinifikanti biex jiġu żviluppati addittivi tal-għalf li jistgħu jnaqqsu u jżommu livelli baxxi ta' kontaminazzjoni mikrobjali matul iċ-ċiklu tal-produzzjoni tal-annimali.
Ftit li xejn huwa magħruf dwar il-mekkaniżmu tar-rispons speċifiku ta' Salmonella għall-aċidu formiku. Madankollu, Huang et al. (62) indikaw li l-aċidu formiku huwa preżenti fl-imsaren irqiq tal-mammiferi u li Salmonella spp. huma kapaċi jipproduċu aċidu formiku. Huang et al. (62) użaw serje ta' mutanti ta' tħassir ta' mogħdijiet ewlenin biex jiskopru l-espressjoni tal-ġeni tal-virulenza ta' Salmonella u sabu li l-format jista' jaġixxi bħala sinjal diffużibbli biex jikkaġuna lis-Salmonella tinvadi ċ-ċelloli epiteljali Hep-2. Riċentement, Liu et al. (63) iżolaw trasportatur tal-format, FocA, minn Salmonella typhimurium li jiffunzjona bħala kanal speċifiku tal-format f'pH 7.0 iżda jista' jiffunzjona wkoll bħala kanal ta' esportazzjoni passiv f'pH estern għoli jew bħala kanal sekondarju attiv ta' importazzjoni ta' format/jone tal-idroġenu f'pH baxx. Madankollu, dan l-istudju twettaq fuq serotip wieħed biss ta' S. Typhimurium. Il-mistoqsija tibqa' jekk is-serotipi kollha jirrispondux għall-aċidu formiku b'mekkaniżmi simili. Din tibqa' mistoqsija kritika ta' riċerka li għandha tiġi indirizzata fi studji futuri. Irrispettivament mir-riżultati, jibqa' prudenti li jintużaw serotipi multipli ta' Salmonella jew saħansitra razez multipli ta' kull serotip f'esperimenti ta' skrinjar meta jiġu żviluppati rakkomandazzjonijiet ġenerali għall-użu ta' supplimenti ta' aċidu biex jitnaqqsu l-livelli ta' Salmonella fl-għalf. Approċċi aktar ġodda, bħall-użu ta' barcoding ġenetiku biex jiġu kkodifikati razez biex jiddistingwu sottogruppi differenti tal-istess serotip (9, 64), joffru l-opportunità li jiġu identifikati differenzi aktar fini li jistgħu jkollhom impatt fuq il-konklużjonijiet u l-interpretazzjoni tad-differenzi.
In-natura kimika u l-forma ta' dissoċjazzjoni tal-format jistgħu jkunu importanti wkoll. F'sensiela ta' studji, Beyer et al. (65–67) urew li l-inibizzjoni ta' Enterococcus faecium, Campylobacter jejuni, u Campylobacter coli kienet korrelata mal-ammont ta' aċidu formiku dissoċjat u kienet indipendenti mill-pH jew mill-aċidu formiku mhux dissoċjat. Il-forma kimika tal-format li għaliha huma esposti l-batterji tidher ukoll li hija importanti. Kovanda et al. (68) skrinjaw diversi organiżmi Gram-negattivi u Gram-pożittivi u qabblu l-konċentrazzjonijiet inibitorji minimi (MICs) tal-format tas-sodju (500–25,000 mg/L) u taħlita ta' format tas-sodju u format ħieles (40/60 m/v; 10–10,000 mg/L). Abbażi tal-valuri tal-MIC, sabu li l-format tas-sodju kien inibitorju biss kontra Campylobacter jejuni, Clostridium perfringens, Streptococcus suis, u Streptococcus pneumoniae, iżda mhux kontra Escherichia coli, Salmonella typhimurium, jew Enterococcus faecalis. B'kuntrast, taħlita ta' format tas-sodju u format tas-sodju ħieles kienet inibitorja kontra l-organiżmi kollha, u wassal lill-awturi biex jikkonkludu li l-aċidu formiku ħieles għandu l-biċċa l-kbira tal-proprjetajiet antimikrobiċi. Ikun interessanti li jiġu eżaminati proporzjonijiet differenti ta' dawn iż-żewġ forom kimiċi biex jiġi determinat jekk il-firxa tal-valuri tal-MIC tikkorrelatax mal-livell ta' aċidu formiku preżenti fil-formula mħallta u r-rispons għal 100% aċidu formiku.
Gomez-Garcia et al. (69) ittestjaw kombinazzjonijiet ta’ żjut essenzjali u aċidi organiċi (bħall-aċidu formiku) kontra iżolati multipli ta’ Escherichia coli, Salmonella, u Clostridium perfringens miksuba mill-ħnieżer. Huma ttestjaw l-effikaċja ta’ sitt aċidi organiċi, inkluż l-aċidu formiku, u sitt żjut essenzjali kontra l-iżolati tal-ħnieżer, bl-użu tal-formaldehyde bħala kontroll pożittiv. Gomez-García et al. (69) iddeterminaw l-MIC50, l-MBC50, u l-MIC50/MBC50 tal-aċidu formiku kontra Escherichia coli (600 u 2400 ppm, 4), Salmonella (600 u 2400 ppm, 4), u Clostridium perfringens (1200 u 2400 ppm, 2), li fosthom l-aċidu formiku nstab li huwa aktar effettiv mill-aċidi organiċi kollha kontra E. coli u Salmonella. (69) L-aċidu formiku huwa effettiv kontra Escherichia coli u Salmonella minħabba d-daqs molekulari żgħir tiegħu u l-katina twila tiegħu (70).
Beyer et al. eżaminaw razez ta' Campylobacter iżolati mill-ħnieżer (66) u razez ta' Campylobacter jejuni iżolati mit-tjur (67) u wrew li l-aċidu formiku jiddisassoċja f'konċentrazzjonijiet konsistenti mar-risponsi tal-MIC imkejla għal aċidi organiċi oħra. Madankollu, il-potenzi relattivi ta' dawn l-aċidi, inkluż l-aċidu formiku, ġew ikkontestati għaliex Campylobacter jista' juża dawn l-aċidi bħala sottostrati (66, 67). L-użu tal-aċidu ta' C. jejuni mhuwiex sorprendenti għaliex intwera li għandu metaboliżmu mhux glikolitiku. Għalhekk, C. jejuni għandu kapaċità limitata għall-kataboliżmu tal-karboidrati u jiddependi fuq il-glukoneġenesi minn aċidi amminiċi u aċidi organiċi għall-biċċa l-kbira tal-metaboliżmu tal-enerġija u l-attività bijosintetika tiegħu (71, 72). Studju bikri minn Line et al. (73) uża firxa fenotipika li fiha 190 sors ta' karbonju u wera li C. jejuni 11168(GS) jista' juża aċidi organiċi bħala sorsi ta' karbonju, li ħafna minnhom huma intermedji taċ-ċiklu tal-aċidu trikarbossiliku. Aktar studji minn Wagli et al. (74) bl-użu ta' firxa fenotipika ta' utilizzazzjoni tal-karbonju wrew li r-razez ta' C. jejuni u E. coli eżaminati fl-istudju tagħhom huma kapaċi jikbru fuq aċidi organiċi bħala sors ta' karbonju. Il-format huwa d-donatur ewlieni tal-elettroni għall-metaboliżmu tal-enerġija respiratorja ta' C. jejuni u, għalhekk, is-sors ewlieni tal-enerġija għal C. jejuni (71, 75). C. jejuni huwa kapaċi juża l-format bħala donatur tal-idroġenu permezz ta' kumpless ta' format dehydrogenase marbut mal-membrana li jossida l-format għal dijossidu tal-karbonju, protoni, u elettroni u jservi bħala donatur tal-elettroni għar-respirazzjoni (72).
L-aċidu formiku għandu storja twila ta' użu bħala sustanza li ttejjeb l-għalf antimikrobjali, iżda xi insetti jistgħu jipproduċu wkoll aċidu formiku għall-użu bħala kimika ta' difiża antimikrobjali. Rossini et al. (76) issuġġerew li l-aċidu formiku jista' jkun kostitwent tal-linfa aċiduża tan-nemel deskritta minn Ray (77) kważi 350 sena ilu. Minn dakinhar 'l hawn, il-fehim tagħna dwar il-produzzjoni tal-aċidu formiku fin-nemel u insetti oħra żdied konsiderevolment, u issa huwa magħruf li dan il-proċess huwa parti minn sistema kumplessa ta' difiża mit-tossini fl-insetti (78). Diversi gruppi ta' insetti, inklużi n-naħal mingħajr tingiża, in-nemel bil-ponta (Hymenoptera: Apidae), il-ħanfus tal-art (Galerita lecontei u G. janus), in-nemel mingħajr tingiża (Formicinae), u xi larva tal-kamli (Lepidoptera: Myrmecophaga), huma magħrufa li jipproduċu aċidu formiku bħala kimika difensiva (76, 78–82).
In-nemel huma forsi l-aktar ikkaratterizzati għax għandhom aċidoċiti, fetħiet speċjalizzati li jippermettulhom jisprejjaw velenu magħmul primarjament minn aċidu formiku (82). In-nemel jużaw is-serina bħala prekursur u jaħżnu ammonti kbar ta' format fil-glandoli tal-velenu tagħhom, li huma iżolati biżżejjed biex jipproteġu n-nemel ospitanti miċ-ċitotossiċità tal-format sakemm jiġi sprejjat (78, 83). L-aċidu formiku li jnixxu jista' (1) iservi bħala feromona ta' allarm biex jattira nemel oħra; (2) ikun kimika difensiva kontra l-kompetituri u l-predaturi; u (3) jaġixxi bħala aġent antifungali u antibatteriku meta kkombinat mar-reżina bħala parti mill-materjal tal-bejta (78, 82, 84–88). L-aċidu formiku prodott min-nemel għandu proprjetajiet antimikrobiċi, li jissuġġerixxi li jista' jintuża bħala addittiv topiku. Dan intwera minn Bruch et al. (88), li żiedu aċidu formiku sintetiku mar-reżina u tejbu b'mod sinifikanti l-attività antifungali. Evidenza ulterjuri tal-effikaċja tal-aċidu formiku u l-utilità bijoloġika tiegħu hija li l-anteaters ġganti, li ma jistgħux jipproduċu aċidu fl-istonku, jikkunsmaw nemel li fihom aċidu formiku biex jipprovdu lilhom infushom b'aċidu formiku kkonċentrat bħala aċidu diġestiv alternattiv (89).
L-użu prattiku tal-aċidu formiku fl-agrikoltura ilu jiġi kkunsidrat u studjat għal ħafna snin. B'mod partikolari, l-aċidu formiku jista' jintuża bħala addittiv għall-għalf tal-annimali u s-silage. Il-format tas-sodju kemm f'forma solida kif ukoll likwida huwa kkunsidrat sikur għall-ispeċi kollha tal-annimali, għall-konsumaturi u għall-ambjent (90). Abbażi tal-valutazzjoni tagħhom (90), konċentrazzjoni massima ta' 10,000 mg ekwivalenti ta' aċidu formiku/kg ta' għalf kienet ikkunsidrata sikura għall-ispeċi kollha tal-annimali, filwaqt li konċentrazzjoni massima ta' 12,000 mg ekwivalenti ta' aċidu formiku/kg ta' għalf kienet ikkunsidrata sikura għall-ħnieżer. L-użu tal-aċidu formiku bħala sustanza li ttejjeb l-għalf tal-annimali ilu jiġi studjat għal ħafna snin. Huwa kkunsidrat li għandu valur kummerċjali bħala preservattiv tas-silage u aġent antimikrobiku fl-għalf tal-annimali u tat-tjur.
Addittivi kimiċi bħall-aċidi minn dejjem kienu element integrali fil-produzzjoni tas-silaġġ u l-ġestjoni tal-għalf (91, 92). Borreani et al. (91) innutaw li biex tinkiseb produzzjoni ottima ta’ silaġġ ta’ kwalità għolja huwa meħtieġ li tinżamm il-kwalità tal-għalf filwaqt li tinżamm kemm jista’ jkun materja niexfa. Ir-riżultat ta’ din l-ottimizzazzjoni huwa l-minimizzazzjoni tat-telf fl-istadji kollha tal-proċess tal-insilaġġ: mill-kundizzjonijiet aerobiċi inizjali fis-silaġġ sal-fermentazzjoni sussegwenti, il-ħażna u l-ftuħ mill-ġdid tas-silaġġ għall-għalf. Metodi speċifiċi għall-ottimizzazzjoni tal-produzzjoni tas-silaġġ fl-għalqa u l-fermentazzjoni sussegwenti tas-silaġġ ġew diskussi fid-dettall x'imkien ieħor (91, 93-95) u mhux se jiġu diskussi fid-dettall hawn. Il-problema ewlenija hija d-deterjorament ossidattiv ikkawżat mill-ħmira u l-moffa meta l-ossiġnu jkun preżenti fis-silaġġ (91, 92). Għalhekk, ġew introdotti inokulanti bijoloġiċi u addittivi kimiċi biex jikkontrobattu l-effetti avversi tat-taħsir (91, 92). Konsiderazzjonijiet oħra għall-addittivi tas-silage jinkludu l-limitazzjoni tat-tixrid ta' patoġeni li jistgħu jkunu preżenti fis-silage (eż., E. coli patoġeniċi, Listeria, u Salmonella) kif ukoll fungi li jipproduċu mikotossini (96–98).
Mack et al. (92) qasmu l-addittivi aċidużi f'żewġ kategoriji. Aċidi bħal aċidi propjoniċi, aċetiċi, sorbiċi, u benżojċi jżommu l-istabbiltà aerobika tas-silage meta jingħata lir-ruminanti billi jillimitaw it-tkabbir tal-ħmira u l-moffa (92). Mack et al. (92) separaw l-aċidu formiku minn aċidi oħra u qisuh bħala aċidifikatur dirett li jinibixxi l-klostridja u l-mikroorganiżmi tat-taħsir filwaqt li jżomm l-integrità tal-proteina tas-silage. Fil-prattika, il-forom tal-melħ tagħhom huma l-aktar forom kimiċi komuni biex jiġu evitati l-proprjetajiet korrużivi tal-aċidi fil-forma mhux mielħa (91). Ħafna gruppi ta' riċerka studjaw ukoll l-aċidu formiku bħala addittiv aċiduż għas-silage. L-aċidu formiku huwa magħruf għall-potenzjal aċidifikanti rapidu tiegħu u l-effett inibitorju tiegħu fuq it-tkabbir ta' mikroorganiżmi tas-silage detrimentali li jnaqqsu l-kontenut ta' proteina u karboidrati li jinħallu fl-ilma tas-silage (99). Għalhekk, He et al. (92) qabblu l-aċidu formiku ma' addittivi aċidużi fis-silage. (100) urew li l-aċidu formiku jista' jinibixxi l-Escherichia coli u jbaxxi l-pH tas-silage. Kulturi batteriċi li jipproduċu l-aċidu formiku u lattiku ġew miżjuda wkoll mas-silage biex jistimulaw l-aċidifikazzjoni u l-produzzjoni tal-aċidu organiku (101). Fil-fatt, Cooley et al. (101) sabu li meta s-silage ġie aċidifikat bi 3% (w/v) aċidu formiku, il-produzzjoni ta' aċidi lattiċi u formiċi qabżet it-800 u l-1000 mg aċidu organiku/100 g kampjun, rispettivament. Mack et al. (92) irrevedew il-letteratura tar-riċerka dwar l-addittivi tas-silage fid-dettall, inklużi studji ppubblikati mill-2000 'l hawn li ffokaw fuq u/jew inkludew l-aċidu formiku u aċidi oħra. Għalhekk, din ir-reviżjoni mhux se tiddiskuti studji individwali fid-dettall iżda sempliċement se tiġbor fil-qosor xi punti ewlenin rigward l-effettività tal-aċidu formiku bħala addittiv kimiku tas-silage. Kemm l-aċidu formiku mhux bufferjat kif ukoll dak bufferjat ġew studjati u fil-biċċa l-kbira tal-każijiet Clostridium spp. L-attivitajiet relattivi tiegħu (teħid ta' karboidrati, proteini, u lattat u eskrezzjoni ta' butirrat) għandhom it-tendenza li jonqsu, filwaqt li l-produzzjoni tal-ammonja u l-butirrat tonqos u ż-żamma tal-materja niexfa tiżdied (92). Hemm limitazzjonijiet għall-prestazzjoni tal-aċidu formiku, iżda l-użu tiegħu bħala addittiv tas-silage flimkien ma' aċidi oħra jidher li jegħleb xi wħud minn dawn il-kwistjonijiet (92).
L-aċidu formiku jista' jinibixxi batterji patoġeniċi li joħolqu riskju għas-saħħa tal-bniedem. Pereżempju, Pauly u Tam (102) inokulaw silos żgħar tal-laboratorju b'L. monocytogenes li fihom tliet livelli differenti ta' materja niexfa (200, 430, u 540 g/kg) ta' ħaxix tas-sejf u mbagħad ġew supplimentati b'aċidu formiku (3 ml/kg) jew batterji tal-aċidu lattiku (8 × 105/g) u enzimi ċellulolitiċi. Huma rrappurtaw li ż-żewġ trattamenti naqqsu L. monocytogenes għal livelli li ma jistgħux jiġu skoperti fis-silaġġ b'materja niexfa baxxa (200 g/kg). Madankollu, fis-silaġġ b'materja niexfa medja (430 g/kg), L. monocytogenes kien għadu skoperti wara 30 jum fis-silaġġ ittrattat bl-aċidu formiku. It-tnaqqis f'L. monocytogenes deher li kien assoċjat ma' pH aktar baxx, aċidu lattiku, u aċidi mhux dissoċjati kkombinati. Pereżempju, Pauly u Tam (102) innutaw li l-aċidu lattiku u l-livelli kkombinati ta' aċidu mhux dissoċjat kienu partikolarment importanti, u dan jista' jkun ir-raġuni għaliex ma ġie osservat l-ebda tnaqqis f'L. monocytogenes f'mezzi ttrattati bl-aċidu formiku minn silaġġi b'kontenut ogħla ta' materja niexfa. Studji simili għandhom isiru fil-futur għal patoġeni komuni oħra tas-silaġġ bħal Salmonella u E. coli patoġeniku. Analiżi aktar komprensiva tas-sekwenza 16S rDNA tal-komunità mikrobjali kollha tas-silaġġ tista' tgħin ukoll biex jiġu identifikati bidliet fil-popolazzjoni mikrobjali ġenerali tas-silaġġ li jseħħu fi stadji differenti tal-fermentazzjoni tas-silaġġ fil-preżenza ta' aċidu formiku (103). Il-kisba ta' dejta dwar il-mikrobijoma tista' tipprovdi appoġġ analitiku biex tbassar aħjar il-progress tal-fermentazzjoni tas-silaġġ u biex tiżviluppa kombinazzjonijiet ottimali ta' addittivi biex tinżamm kwalità għolja tas-silaġġ.
Fl-għalf tal-annimali bbażat fuq il-qmuħ, l-aċidu formiku jintuża bħala aġent antimikrobiku biex jillimita l-livelli ta' patoġeni f'diversi matriċi tal-għalf derivati ​​mill-qmuħ kif ukoll f'ċerti ingredjenti tal-għalf bħal prodotti sekondarji tal-annimali. L-effetti fuq il-popolazzjonijiet ta' patoġeni fit-tjur u annimali oħra jistgħu jinqasmu b'mod ġenerali f'żewġ kategoriji: effetti diretti fuq il-popolazzjoni ta' patoġeni tal-għalf innifsu u effetti indiretti fuq patoġeni li jikkolonizzaw il-passaġġ gastrointestinali tal-annimali wara li jikkunsmaw l-għalf ittrattat (20, 21, 104). Jidher ċar li dawn iż-żewġ kategoriji huma interrelatati, peress li tnaqqis fil-patoġeni fl-għalf għandu jirriżulta fi tnaqqis fil-kolonizzazzjoni meta l-annimal jikkonsma l-għalf. Madankollu, il-proprjetajiet antimikrobiċi ta' aċidu partikolari miżjud ma' matriċi tal-għalf jistgħu jiġu influwenzati minn diversi fatturi, bħall-kompożizzjoni tal-għalf u l-forma li fiha jiżdied l-aċidu (21, 105).
Storikament, l-użu tal-aċidu formiku u aċidi oħra relatati ffoka primarjament fuq il-kontroll dirett tas-Salmonella fl-għalf tal-annimali u tat-tjur (21). Ir-riżultati ta’ dawn l-istudji ġew miġbura fil-qosor fid-dettall f’diversi reviżjonijiet ippubblikati fi żminijiet differenti (18, 21, 26, 47, 104–106), għalhekk uħud biss mis-sejbiet ewlenin minn dawn l-istudji huma diskussi f’din ir-reviżjoni. Diversi studji wrew li l-attività antimikrobika tal-aċidu formiku fil-matriċi tal-għalf tiddependi mid-doża u l-ħin ta’ espożizzjoni għall-aċidu formiku, il-kontenut ta’ umdità tal-matriċi tal-għalf, u l-konċentrazzjoni batterika fl-għalf u fil-passaġġ gastrointestinali tal-annimal (19, 21, 107–109). It-tip ta’ matriċi tal-għalf u s-sors tal-ingredjenti tal-għalf tal-annimali huma wkoll fatturi li jinfluwenzaw. Għalhekk, numru ta’ studji wrew li l-livelli tas-Salmonella It-tossini batteriċi iżolati minn prodotti sekondarji tal-annimali jistgħu jkunu differenti minn dawk iżolati minn prodotti sekondarji tal-pjanti (39, 45, 58, 59, 110–112). Madankollu, id-differenzi fir-rispons għal aċidi bħall-aċidu formiku jistgħu jkunu relatati mad-differenzi fis-sopravivenza tas-serovar fid-dieta u t-temperatura li fiha tiġi pproċessata d-dieta (19, 113, 114). Id-differenzi fir-rispons tas-serovar għat-trattament bl-aċidu jistgħu wkoll ikunu fattur fil-kontaminazzjoni tat-tjur b'għalf ikkontaminat (113, 115), u d-differenzi fl-espressjoni tal-ġeni tal-virulenza (116) jistgħu wkoll ikollhom rwol. Id-differenzi fit-tolleranza għall-aċidu jistgħu min-naħa tagħhom jaffettwaw id-detezzjoni tas-Salmonella fil-mezzi tal-kultura jekk l-aċidi li jinġarru mill-għalf ma jkunux ibbilanċjati b'mod adegwat (21, 105, 117–122). Il-forma fiżika tad-dieta (f'termini ta' daqs tal-partiċelli) tista' wkoll tinfluwenza d-disponibbiltà relattiva tal-aċidu formiku fil-passaġġ gastrointestinali (123).
Strateġiji biex tiġi ottimizzata l-attività antimikrobika tal-aċidu formiku miżjud mal-għalf huma wkoll kritiċi. Ġew issuġġeriti konċentrazzjonijiet ogħla tal-aċidu għal ingredjenti tal-għalf b'kontaminazzjoni għolja qabel it-taħlit tal-għalf biex jiġi minimizzat il-ħsara potenzjali lit-tagħmir tal-mitħna tal-għalf u problemi bil-palatabilità tal-għalf tal-annimali (105). Jones (51) ikkonkluda li s-Salmonella preżenti fl-għalf qabel it-tindif kimiku hija aktar diffiċli biex tiġi kkontrollata mis-Salmonella f'kuntatt mal-għalf wara trattament kimiku. It-trattament termali tal-għalf waqt l-ipproċessar fil-mitħna tal-għalf ġie ssuġġerit bħala intervent biex tiġi limitata l-kontaminazzjoni tal-għalf mis-Salmonella, iżda dan jiddependi fuq il-kompożizzjoni tal-għalf, id-daqs tal-partiċelli, u fatturi oħra assoċjati mal-proċess tat-tħin (51). L-attività antimikrobika tal-aċidi tiddependi wkoll mit-temperatura, u temperaturi elevati fil-preżenza ta' aċidi organiċi jista' jkollhom effett inibitorju sinerġistiku fuq is-Salmonella, kif osservat f'kulturi likwidi tas-Salmonella (124, 125). Diversi studji dwar għalf ikkontaminat bis-Salmonella jappoġġjaw l-idea li temperaturi elevati jżidu l-effettività tal-aċidi fil-matriċi tal-għalf (106, 113, 126). Amado et al. (127) użaw disinn kompost ċentrali biex jistudjaw l-interazzjoni tat-temperatura u l-aċidu (aċidu formiku jew lattiku) f'10 razez ta' Salmonella enterica u Escherichia coli iżolati minn diversi għalf tal-baqar u inokulati fi pritkuni tal-baqar aċidifikati. Huma kkonkludew li s-sħana kienet il-fattur dominanti li jinfluwenza t-tnaqqis mikrobjali, flimkien mal-aċidu u t-tip ta' iżolat batterjali. L-effett sinerġistiku mal-aċidu għadu jippredomina, għalhekk jistgħu jintużaw temperaturi u konċentrazzjonijiet ta' aċidu aktar baxxi. Madankollu, huma nnutaw ukoll li l-effetti sinerġistiċi mhux dejjem ġew osservati meta ntuża l-aċidu formiku, u dan wassalhom biex jissuspettaw li l-volatilizzazzjoni tal-aċidu formiku f'temperaturi ogħla jew l-effetti ta' buffering tal-komponenti tal-matriċi tal-għalf kienu fattur.
Il-limitazzjoni tal-ħajja fuq l-ixkaffa tal-għalf qabel ma jingħata lill-annimali hija mod wieħed kif tiġi kkontrollata l-introduzzjoni ta' patoġeni li jinġarru mill-ikel fil-ġisem tal-annimal waqt l-għalf. Madankollu, ladarba l-aċidu fl-għalf ikun daħal fil-passaġġ gastrointestinali, jista' jkompli jeżerċita l-attività antimikrobika tiegħu. L-attività antimikrobika ta' sustanzi aċidużi amministrati b'mod eżoġenu fil-passaġġ gastrointestinali tista' tiddependi fuq varjetà ta' fatturi, inkluż il-konċentrazzjoni tal-aċidu gastriku, is-sit attiv tal-passaġġ gastrointestinali, il-pH u l-kontenut ta' ossiġnu tal-passaġġ gastrointestinali, l-età tal-annimal, u l-kompożizzjoni relattiva tal-popolazzjoni mikrobjali gastrointestinali (li tiddependi fuq il-post tal-passaġġ gastrointestinali u l-maturità tal-annimal) (21, 24, 128–132). Barra minn hekk, il-popolazzjoni residenti ta' mikro-organiżmi anerobiċi fil-passaġġ gastrointestinali (li ssir dominanti fil-passaġġ diġestiv t'isfel tal-annimali monogastriċi hekk kif jimmaturaw) tipproduċi b'mod attiv aċidi organiċi permezz tal-fermentazzjoni, li min-naħa tagħhom jista' jkollhom ukoll effett antagonistiku fuq patoġeni temporanji li jidħlu fil-passaġġ gastrointestinali (17, 19–21).
Ħafna mir-riċerka bikrija ffokat fuq l-użu ta' aċidi organiċi, inkluż il-format, biex tillimita s-Salmonella fil-passaġġ gastrointestinali tat-tjur, li ġie diskuss fid-dettall f'diversi reviżjonijiet (12, 20, 21). Meta dawn l-istudji jiġu kkunsidrati flimkien, jistgħu jsiru diversi osservazzjonijiet ewlenin. McHan u Shotts (133) irrappurtaw li l-għoti ta' aċidu formiku u propjoniku naqqas il-livelli ta' Salmonella Typhimurium fiċ-ċekum tat-tiġieġ inokulati bil-batterji u kwantifikawhom f'7, 14, u 21 jum ta' età. Madankollu, meta Hume et al. (128) immonitorjaw il-propjonat immarkat b'C-14, ikkonkludew li ftit li xejn propionat fid-dieta jista' jilħaq iċ-ċekum. Għad irid jiġi determinat jekk dan huwiex minnu wkoll għall-aċidu formiku. Madankollu, reċentement Bourassa et al. (134) irrapporta li t-tmigħ tal-aċidu formiku u propjoniku naqqas il-livelli ta’ Salmonella Typhimurium fiċ-ċekum tat-tiġieġ inokulati bil-batterja, li ġew kwantifikati f’età ta’ 7, 14, u 21 jum. (132) innota li t-tmigħ tal-aċidu formiku b’4 g/t lit-tiġieġ tal-brojler matul il-perjodu ta’ tkabbir ta’ 6 ġimgħat naqqas il-konċentrazzjoni ta’ S. Typhimurium fiċ-ċekum għal taħt il-livell ta’ skoperta.
Il-preżenza ta' aċidu formiku fid-dieta jista' jkollha effetti fuq partijiet oħra tal-passaġġ gastrointestinali tat-tjur. Al-Tarazi u Alshavabkeh (134) urew li taħlita ta' aċidu formiku u aċidu propjoniku tista' tnaqqas il-kontaminazzjoni ta' Salmonella pullorum (S. PRlorum) fl-uċuħ tar-raba' u ċ-ċekum. Thompson u Hinton (129) osservaw li taħlita disponibbli kummerċjalment ta' aċidu formiku u aċidu propjoniku żiedet il-konċentrazzjoni taż-żewġ aċidi fl-uċuħ tar-raba' u l-qanżħa u kienet batteriċida kontra Salmonella Enteritidis PT4 f'mudell in vitro taħt kundizzjonijiet rappreżentattivi ta' trobbija. Din l-idea hija appoġġjata minn dejta in vivo minn Bird et al. (135) żiedu aċidu formiku mal-ilma tax-xorb tat-tiġieġ tal-brojler matul perjodu ta' sawm simulat qabel it-tbaħħir, simili għal dak li jgħaddu minnu t-tiġieġ tal-brojler waqt is-sawm qabel it-trasport lejn impjant tal-ipproċessar tat-tjur. Iż-żieda ta' aċidu formiku mal-ilma tax-xorb irriżultat fi tnaqqis fin-numru ta' S. Typhimurium fl-uċuħ tar-raba' u fl-epididimi, u tnaqqis fil-frekwenza ta' uċuħ tar-raba' pożittivi għal S. Typhimurium, iżda mhux fin-numru ta' epididimi pożittivi (135). L-iżvilupp ta' sistemi ta' kunsinna li jistgħu jipproteġu l-aċidi organiċi waqt li jkunu attivi fil-passaġġ gastrointestinali t'isfel jista' jgħin biex titjieb l-effikaċja. Pereżempju, il-mikroinkapsulament tal-aċidu formiku u ż-żieda tiegħu mal-għalf intwera li jnaqqas in-numru ta' Salmonella Enteritidis fil-kontenut taċ-ċeku (136). Madankollu, dan jista' jvarja skont l-ispeċi tal-annimal. Pereżempju, Walia et al. (137) ma osservawx tnaqqis fis-Salmonella fiċ-ċeku jew fil-limfonodi ta' ħnieżer ta' 28 jum li ngħataw taħlita ta' aċidu formiku, aċidu ċitriku, u kapsuli taż-żejt essenzjali, u għalkemm l-eskrezzjoni tas-Salmonella fl-ippurgar tnaqqset fil-jum 14, ma tnaqqsitx fil-jum 28. Huma wrew li t-trażmissjoni orizzontali tas-Salmonella bejn il-ħnieżer ġiet evitata.
Għalkemm studji dwar l-aċidu formiku bħala aġent antimikrobiku fit-trobbija tal-annimali ffokaw primarjament fuq is-Salmonella li tinġarr mill-ikel, hemm ukoll xi studji li jimmiraw lejn patoġeni gastrointestinali oħra. Studji in vitro minn Kovanda et al. (68) jissuġġerixxu li l-aċidu formiku jista' jkun effettiv ukoll kontra patoġeni gastrointestinali oħra li jinġarru mill-ikel, inklużi Escherichia coli u Campylobacter jejuni. Studji preċedenti wrew li aċidi organiċi (eż., aċidu lattiku) u taħlitiet kummerċjali li fihom aċidu formiku bħala ingredjent jistgħu jnaqqsu l-livelli ta' Campylobacter fit-tjur (135, 138). Madankollu, kif innutat qabel minn Beyer et al. (67), l-użu tal-aċidu formiku bħala aġent antimikrobiku kontra Campylobacter jista' jeħtieġ kawtela. Din is-sejba hija partikolarment problematika għas-supplimentazzjoni tad-dieta fit-tjur għaliex l-aċidu formiku huwa s-sors primarju ta' enerġija għar-respirazzjoni għal C. jejuni. Barra minn hekk, parti min-niċċa gastrointestinali tiegħu hija maħsuba li hija dovuta għal cross-feeding metaboliku ma' prodotti ta' fermentazzjoni ta' aċidu mħallat prodotti minn batterji gastrointestinali, bħal format (139). Din l-opinjoni għandha xi bażi. Minħabba li l-format huwa kemoattrattant għal C. jejuni, mutanti doppji b'difetti kemm fid-deidroġenażi tal-format kif ukoll fl-idroġenażi għandhom rati mnaqqsa ta' kolonizzazzjoni ċekali fit-tiġieġ tal-brojler meta mqabbla mar-razez selvaġġi ta' C. jejuni (140, 141). Għadu mhux ċar sa liema punt is-supplimentazzjoni esterna tal-aċidu formiku taffettwa l-kolonizzazzjoni tal-passaġġ gastrointestinali minn C. jejuni fit-tiġieġ. Il-konċentrazzjonijiet attwali tal-format gastrointestinali jistgħu jkunu aktar baxxi minħabba l-kataboliżmu tal-format minn batterji gastrointestinali oħra jew l-assorbiment tal-format fil-passaġġ gastrointestinali ta' fuq, għalhekk diversi varjabbli jistgħu jinfluwenzaw dan. Barra minn hekk, il-format huwa prodott potenzjali ta' fermentazzjoni prodott minn xi batterji gastrointestinali, li jista' jinfluwenza l-livelli totali tal-format gastrointestinali. Il-kwantifikazzjoni tal-format fil-kontenut gastrointestinali u l-identifikazzjoni tal-ġeni tad-deidroġenażi tal-format bl-użu tal-metaġenomika jistgħu jitfgħu dawl fuq xi aspetti tal-ekoloġija tal-mikroorganiżmi li jipproduċu l-format.
Roth et al. (142) qabblu l-effetti tat-tmigħ tat-tiġieġ tal-brojler bl-antibijotiku enrofloxacin jew taħlita ta' aċidi formiċi, aċetiċi, u propjoniċi fuq il-prevalenza ta' Escherichia coli reżistenti għall-antibijotiċi. Iżolati totali u reżistenti għall-antibijotiċi ta' E. coli ġew magħduda f'kampjuni fekali miġbura minn tiġieġ tal-brojler ta' ġurnata u f'kampjuni tal-kontenut taċ-ċekali minn tiġieġ tal-brojler ta' 14 u 38 jum. Iżolati ta' E. coli ġew ittestjati għar-reżistenza għall-ampicillin, cefotaxime, ciprofloxacin, streptomycin, sulfamethoxazole, u tetracycline skont punti ta' qsim determinati qabel għal kull antibijotiku. Meta l-popolazzjonijiet rispettivi ta' E. coli ġew kwantifikati u kkaratterizzati, la l-enrofloxacin u lanqas is-supplimentazzjoni tat-taħlita tal-aċidu ma biddlu n-numru totali ta' E. coli iżolati miċ-ċeka ta' tiġieġ tal-brojler ta' 17 u 28 jum. L-għasafar li ngħataw id-dieta supplimentata b'enrofloxacin kellhom livelli ogħla ta' E. coli reżistenti għal ciprofloxacin, streptomycin, sulfamethoxazole, u tetracycline u livelli mnaqqsa ta' E. coli reżistenti għal cefotaxime fiċ-ċeka. L-għasafar li ngħataw il-cocktail kellhom numru mnaqqas ta' E. coli reżistenti għal ampiċillina u tetracycline fiċ-ċeka meta mqabbla mal-kontrolli u l-għasafar supplimentati b'enrofloxacin. L-għasafar li ngħataw l-aċidu mħallat kellhom ukoll tnaqqis fin-numru ta' E. coli reżistenti għal ciprofloxacin u sulfamethoxazole fiċ-ċeka meta mqabbla mal-għasafar li ngħataw enrofloxacin. Il-mekkaniżmu li bih l-aċidi jnaqqsu n-numru ta' E. coli reżistenti għall-antibijotiċi mingħajr ma jnaqqsu n-numru totali ta' E. coli għadu mhux ċar. Madankollu, ir-riżultati tal-istudju minn Roth et al. huma konsistenti ma' dawk tal-grupp ta' enrofloxacin. (142) Dan jista' jkun indikazzjoni ta' tixrid imnaqqas ta' ġeni ta' reżistenza għall-antibijotiċi f'E. coli, bħall-inibituri marbuta mal-plasmid deskritti minn Cabezon et al. (143). Ikun interessanti li titwettaq analiżi aktar fil-fond tar-reżistenza għall-antibijotiċi medjata mill-plażmidi fil-popolazzjoni gastrointestinali tat-tjur fil-preżenza ta' addittivi tal-għalf bħall-aċidu formiku u li din l-analiżi tiġi rfinuta aktar billi tiġi vvalutata r-reżistenza gastrointestinali.
L-iżvilupp ta' addittivi tal-għalf antimikrobiċi ottimali kontra l-patoġeni idealment għandu jkollu impatt minimu fuq il-flora gastrointestinali ġenerali, partikolarment fuq dawk il-mikrobijoti kkunsidrati ta' benefiċċju għall-ospitant. Madankollu, aċidi organiċi amministrati b'mod eżoġenu jista' jkollhom effetti detrimentali fuq il-mikrobijota gastrointestinali residenti u sa ċertu punt ineħħu l-proprjetajiet protettivi tagħhom kontra l-patoġeni. Pereżempju, Thompson u Hinton (129) osservaw livelli mnaqqsa ta' aċidu lattiku fl-uċuħ tar-raba' fit-tiġieġ tal-bajd li ngħataw taħlita ta' aċidi formiċi u propjoniċi, li jissuġġerixxi li l-preżenza ta' dawn l-aċidi organiċi eżoġeni fl-uċuħ tar-raba' rriżultat fi tnaqqis fil-lattobaċilli tal-uċuħ tar-raba'. Il-lattobaċilli tal-uċuħ tar-raba' huma kkunsidrati bħala ostaklu għas-Salmonella, u għalhekk it-tfixkil ta' din il-mikrobijota residenti tal-uċuħ tar-raba' jista' jkun ta' detriment għat-tnaqqis b'suċċess tal-kolonizzazzjoni tas-Salmonella tal-passaġġ gastrointestinali (144). Açıkgöz et al. sabu li l-effetti tal-passaġġ gastrointestinali t'isfel tal-għasafar jistgħu jkunu aktar baxxi. (145) Ma nstabet l-ebda differenza fil-flora intestinali totali jew fl-għadd ta' Escherichia coli fi tiġieġ tal-brojler ta' 42 jum li jixorbu ilma aċidifikat bl-aċidu formiku. L-awturi ssuġġerew li dan jista' jkun minħabba li l-formate jiġi metabolizzat fil-parti ta' fuq tal-apparat gastrointestinali, kif ġie osservat minn investigaturi oħra b'aċidi grassi b'katina qasira (SCFA) mogħtija b'mod eżoġenu (128, 129).
Il-protezzjoni tal-aċidu formiku permezz ta' xi forma ta' inkapsulament tista' tgħinu jilħaq il-passaġġ gastrointestinali t'isfel. (146) innutaw li l-aċidu formiku mikroinkapsulat żied b'mod sinifikanti l-kontenut totali ta' aċidu xaħmi b'katina qasira (SCFA) fiċ-ċekum tal-ħnieżer meta mqabbel mal-ħnieżer mitmugħa aċidu formiku mhux protett. Dan ir-riżultat wassal lill-awturi biex jissuġġerixxu li l-aċidu formiku jista' jilħaq b'mod effettiv il-passaġġ gastrointestinali t'isfel jekk ikun protett kif suppost. Madankollu, diversi parametri oħra, bħal konċentrazzjonijiet ta' format u lattat, għalkemm ogħla minn dawk fil-ħnieżer mitmugħa dieta ta' kontroll, ma kinux statistikament differenti minn dawk fil-ħnieżer mitmugħa dieta ta' format mhux protetta. Għalkemm il-ħnieżer mitmugħa kemm aċidu formiku mhux protett kif ukoll protett urew żieda ta' kważi tliet darbiet fl-aċidu lattiku, l-għadd tal-lattobaċilli ma nbidilx bl-ebda trattament. Id-differenzi jistgħu jkunu aktar evidenti għal mikro-organiżmi oħra li jipproduċu l-aċidu lattiku fiċ-ċekum (1) li mhumiex skoperti b'dawn il-metodi u/jew (2) li l-attività metabolika tagħhom hija affettwata, u b'hekk ibiddlu l-mudell tal-fermentazzjoni b'tali mod li l-lattobaċilli residenti jipproduċu aktar aċidu lattiku.
Biex jiġu studjati b'mod aktar preċiż l-effetti tal-addittivi tal-għalf fuq il-passaġġ gastrointestinali tal-annimali tar-razzett, huma meħtieġa metodi ta' identifikazzjoni mikrobjali b'riżoluzzjoni ogħla. Fl-aħħar ftit snin, is-sekwenzar tal-ġenerazzjoni li jmiss (NGS) tal-ġene 16S RNA intuża biex jidentifika t-taxa tal-mikrobijomi u jqabbel id-diversità tal-komunitajiet mikrobjali (147), li pprovda fehim aħjar tal-interazzjonijiet bejn l-addittivi tal-għalf tad-dieta u l-mikrobijota gastrointestinali tal-annimali tal-ikel bħat-tjur.
Diversi studji użaw is-sekwenzar tal-mikrobijoma biex jevalwaw ir-rispons tal-mikrobijoma gastrointestinali tat-tiġieġ għas-supplimentazzjoni tal-format. Oakley et al. (148) wettqu studju fuq tiġieġ tal-brojler ta’ 42 jum supplimentati b’diversi kombinazzjonijiet ta’ aċidu formiku, aċidu propjoniku, u aċidi grassi ta’ katina medja fl-ilma tax-xorb jew fl-għalf tagħhom. It-tiġieġ immunizzati ġew sfidati b’razza ta’ Salmonella typhimurium reżistenti għall-aċidu nalidiksiku u ċ-ċeka tagħhom tneħħiet fl-età ta’ 0, 7, 21, u 42 jum. Il-kampjuni taċ-ċeka ġew ippreparati għal 454 pirosekwenzar u r-riżultati tas-sekwenzar ġew evalwati għall-klassifikazzjoni u t-tqabbil tax-xebh. B’mod ġenerali, it-trattamenti ma affettwawx b’mod sinifikanti l-mikrobijoma taċ-ċeka jew il-livelli ta’ S. Typhimurium. Madankollu, ir-rati ġenerali ta’ skoperta tas-Salmonella naqsu hekk kif l-għasafar kibru fl-età, kif ikkonfermat mill-analiżi tassonomika tal-mikrobijoma, u l-abbundanza relattiva tas-sekwenzi tas-Salmonella naqset ukoll maż-żmien. L-awturi jinnutaw li hekk kif il-brojlers kibru fl-età, id-diversità tal-popolazzjoni mikrobjali taċ-ċekal żdiedet, bl-aktar bidliet sinifikanti fil-flora gastrointestinali osservati fil-gruppi kollha ta’ trattament. Fi studju reċenti, Hu et al. (149) qabblu l-effetti tal-ilma tax-xorb u t-tmigħ ta’ dieta supplimentata b’taħlita ta’ aċidi organiċi (aċidu formiku, aċidu aċetiku, aċidu propjoniku, u format tal-ammonju) u virginiamycin fuq kampjuni tal-mikrobijoma taċ-ċekal minn tiġieġ tal-brojlers miġbura f’żewġ stadji (1–21 jum u 22–42 jum). Għalkemm ġew osservati xi differenzi fid-diversità tal-mikrobijoma taċ-ċekal fost il-gruppi ta’ trattament fl-età ta’ 21 jum, ma nstabet l-ebda differenza fid-diversità tal-batterji α- jew β- fi 42 jum. Minħabba n-nuqqas ta’ differenzi fl-età ta’ 42 jum, l-awturi ipoteżizzaw li l-vantaġġ fit-tkabbir jista’ jkun dovut għall-istabbiliment aktar bikri ta’ mikrobijoma ottimament divers.
L-analiżi tal-mikrobijoma li tiffoka biss fuq il-komunità mikrobjali taċ-ċekal tista' ma tirriflettix fejn fil-passaġġ gastrointestinali jseħħu l-biċċa l-kbira tal-effetti tal-aċidi organiċi tad-dieta. Il-mikrobijoma tal-passaġġ gastrointestinali ta' fuq tat-tiġieġ tal-brojler tista' tkun aktar suxxettibbli għall-effetti tal-aċidi organiċi tad-dieta, kif issuġġerit mir-riżultati ta' Hume et al. (128). Hume et al. (128) urew li l-biċċa l-kbira tal-propjonat miżjud b'mod eżoġenu ġie assorbit fil-passaġġ gastrointestinali ta' fuq tal-għasafar. Studji reċenti dwar il-karatterizzazzjoni tal-mikroorganiżmi gastrointestinali jappoġġjaw ukoll din il-vista. Nava et al. (150) urew li taħlita ta' aċidi organiċi [DL-2-hydroxy-4(methylthio)butyric acid], aċidu formiku, u aċidu propjoniku (HFP) affettwat il-mikrobijota tal-imsaren u żiedet il-kolonizzazzjoni ta' Lactobacillus fl-ileum tat-tiġieġ. Riċentement, Goodarzi Borojeni et al. (150) wera li taħlita ta' aċidu organiku [DL-2-hydroxy-4(methylthio)butyric acid], aċidu formiku, u aċidu propjoniku (HFP) affettwat il-mikrobijota tal-imsaren u żiedet il-kolonizzazzjoni ta' Lactobacillus fl-ileum tat-tiġieġ. (151) studja t-tmigħ ta' tiġieġ tal-brojler b'taħlita ta' aċidu formiku u aċidu propjoniku f'żewġ konċentrazzjonijiet (0.75% u 1.50%) għal 35 jum. Fi tmiem l-esperiment, il-wiċċ tar-raba', l-istonku, żewġ terzi distali tal-ileum, u ċ-ċekum tneħħew u ttieħdu kampjuni għal analiżi kwantitattiva ta' flora gastrointestinali speċifika u metaboliti bl-użu ta' RT-PCR. Fil-kultura, il-konċentrazzjoni ta' aċidi organiċi ma affettwatx l-abbundanza ta' Lactobacillus jew Bifidobacterium, iżda żiedet il-popolazzjoni ta' Clostridium. Fl-ileum, l-uniċi bidliet kienu tnaqqis f'Lactobacillus u Enterobacter, filwaqt li fiċ-ċekum din il-flora baqgħet l-istess (151). Fl-ogħla konċentrazzjoni ta' supplimentazzjoni ta' aċidu organiku, il-konċentrazzjoni totali ta' aċidu lattiku (D u L) tnaqqset fl-uċuħ tar-raba', il-konċentrazzjoni taż-żewġ aċidi organiċi tnaqqset fil-qanżħa, u l-konċentrazzjoni ta' aċidi organiċi kienet aktar baxxa fiċ-ċekum. Ma kien hemm l-ebda tibdil fl-ileum. Fir-rigward tal-aċidi grassi b'katina qasira (SCFAs), l-unika bidla fl-uċuħ tar-raba' u l-qanżħa tal-għasafar li ngħataw aċidi organiċi kienet fil-livell ta' propionat. L-għasafar li ngħataw il-konċentrazzjoni aktar baxxa ta' aċidu organiku wrew żieda ta' kważi għaxar darbiet fil-propionat fl-uċuħ tar-raba', filwaqt li l-għasafar li ngħataw iż-żewġ konċentrazzjonijiet ta' aċidu organiku wrew żieda ta' tmien u ħmistax-il darba fil-propionat fil-qanżħa, rispettivament. Iż-żieda fl-aċetat fl-ileum kienet inqas mid-doppju. B'mod ġenerali, din id-dejta tappoġġja l-fehma li ħafna mill-effetti tal-applikazzjoni esterna ta' aċidu organiku kienu evidenti fir-rendiment, filwaqt li l-aċidi organiċi kellhom effetti minimi fuq il-komunità mikrobjali gastrointestinali t'isfel, li jissuġġerixxi li x-xejriet ta' fermentazzjoni tal-flora residenti gastrointestinali ta' fuq setgħu nbidlu.
Jidher ċar li hija meħtieġa karatterizzazzjoni aktar fil-fond tal-mikrobijoma biex jiġu ċċarati bis-sħiħ ir-risponsi mikrobjali għall-format fil-passaġġ gastrointestinali kollu. Analiżi aktar fil-fond tat-tassonomija mikrobjali ta' kompartimenti gastrointestinali speċifiċi, partikolarment kompartimenti ta' fuq bħall-wiċċ tar-raba', tista' tipprovdi aktar għarfien dwar l-għażla ta' ċerti gruppi ta' mikro-organiżmi. L-attivitajiet metaboliċi u enżimatiċi tagħhom jistgħu wkoll jiddeterminaw jekk għandhomx relazzjoni antagonistika ma' patoġeni li jidħlu fil-passaġġ gastrointestinali. Ikun interessanti wkoll li jsiru analiżi metaġenomiċi biex jiġi determinat jekk l-esponiment għal addittivi kimiċi aċidużi matul il-ħajja tal-għasafar jagħżilx batterji residenti aktar "tolleranti għall-aċidu", u jekk il-preżenza u/jew l-attività metabolika ta' dawn il-batterji tirrappreżentax ostaklu addizzjonali għall-kolonizzazzjoni tal-patoġeni.
L-aċidu formiku ilu jintuża għal ħafna snin bħala addittiv kimiku fl-għalf tal-annimali u bħala aċidifikatur tas-silage. Wieħed mill-użi ewlenin tiegħu huwa l-azzjoni antimikrobika tiegħu biex jillimita n-numru ta' patoġeni fl-għalf u l-kolonizzazzjoni sussegwenti tagħhom fil-passaġġ gastrointestinali tal-għasafar. Studji in vitro wrew li l-aċidu formiku huwa aġent antimikrobiku relattivament effettiv kontra s-Salmonella u patoġeni oħra. Madankollu, l-użu tal-aċidu formiku fil-matriċi tal-għalf jista' jkun limitat mill-ammont għoli ta' materja organika fl-ingredjenti tal-għalf u l-kapaċità potenzjali tagħhom ta' buffering. L-aċidu formiku jidher li għandu effett antagonistiku fuq is-Salmonella u patoġeni oħra meta jinbela' permezz tal-għalf jew l-ilma tax-xorb. Madankollu, dan l-antagoniżmu jseħħ primarjament fil-passaġġ gastrointestinali ta' fuq, peress li l-konċentrazzjonijiet tal-aċidu formiku jistgħu jitnaqqsu fil-passaġġ gastrointestinali t'isfel, kif inhu l-każ bl-aċidu propjoniku. Il-kunċett tal-protezzjoni tal-aċidu formiku permezz tal-inkapsulament joffri approċċ potenzjali biex jitwassal aktar aċidu fil-passaġġ gastrointestinali t'isfel. Barra minn hekk, studji wrew li taħlita ta' aċidi organiċi hija aktar effettiva fit-titjib tal-prestazzjoni tat-tjur milli l-għoti ta' aċidu wieħed (152). Campylobacter fil-passaġġ gastrointestinali jista' jirrispondi b'mod differenti għall-format, peress li jista' juża l-format bħala donatur tal-elettroni, u l-format huwa s-sors ewlieni tal-enerġija tiegħu. Mhuwiex ċar jekk iż-żieda fil-konċentrazzjonijiet tal-format fil-passaġġ gastrointestinali tkunx ta' benefiċċju għall-Campylobacter, u dan jista' ma jseħħx skont flora gastrointestinali oħra li tista' tuża l-format bħala sottostrat.
Huma meħtieġa studji addizzjonali biex jiġu investigati l-effetti tal-aċidu formiku gastrointestinali fuq mikrobi gastrointestinali residenti mhux patoġeniċi. Aħna nippreferu nimmiraw b'mod selettiv il-patoġeni mingħajr ma nfixklu l-membri tal-mikrobijoma gastrointestinali li huma ta' benefiċċju għall-ospitant. Madankollu, dan jirrikjedi analiżi aktar fil-fond tas-sekwenza tal-mikrobijoma ta' dawn il-komunitajiet mikrobjali gastrointestinali residenti. Għalkemm ġew ippubblikati xi studji dwar il-mikrobijoma ċekali ta' għasafar ittrattati bl-aċidu formiku, hija meħtieġa aktar attenzjoni għall-komunità mikrobjali gastrointestinali ta' fuq. L-identifikazzjoni tal-mikroorganiżmi u t-tqabbil tax-xebh bejn il-komunitajiet mikrobjali gastrointestinali fil-preżenza jew fin-nuqqas ta' aċidu formiku jistgħu jkunu deskrizzjoni mhux kompluta. Huma meħtieġa analiżi addizzjonali, inklużi l-metabolomika u l-metagenomika, biex jiġu kkaratterizzati d-differenzi funzjonali bejn gruppi kompożizzjonalment simili. Tali karatterizzazzjoni hija kritika biex tiġi stabbilita r-relazzjoni bejn il-komunità mikrobjali gastrointestinali u r-risponsi tal-prestazzjoni tal-għasafar għal sustanzi li jtejbu bbażati fuq l-aċidu formiku. Il-kombinazzjoni ta' approċċi multipli biex tiġi kkaratterizzata b'mod aktar preċiż il-funzjoni gastrointestinali għandha tippermetti l-iżvilupp ta' strateġiji aktar effettivi għas-supplimentazzjoni tal-aċidu organiku u fl-aħħar mill-aħħar ittejjeb it-tbassir tas-saħħa u l-prestazzjoni ottimali tal-għasafar filwaqt li tillimita r-riskji għas-sikurezza tal-ikel.
SR kiteb din ir-reviżjoni bl-għajnuna ta’ DD u KR. L-awturi kollha taw kontribuzzjonijiet sostanzjali għax-xogħol ippreżentat f’din ir-reviżjoni.
L-awturi jiddikjaraw li din ir-reviżjoni rċeviet finanzjament mingħand Anitox Corporation biex tibda l-kitba u l-pubblikazzjoni ta’ din ir-reviżjoni. Il-finanzjaturi ma kellhom l-ebda influwenza fuq il-fehmiet u l-konklużjonijiet espressi f’dan l-artiklu ta’ reviżjoni jew fuq id-deċiżjoni li jiġi ppubblikat.
L-awturi l-oħra jiddikjaraw li r-riċerka twettqet fin-nuqqas ta' kwalunkwe relazzjoni kummerċjali jew finanzjarja li tista' tiġi interpretata bħala kunflitt ta' interess potenzjali.
Dr. DD tixtieq tirringrazzja lill-appoġġ tal-Iskola Gradwata tal-Università ta' Arkansas permezz ta' Distinguished Teaching Fellowship, kif ukoll l-appoġġ kontinwu mill-Programm tal-Bijoloġija taċ-Ċelloli u Molekulari tal-Università ta' Arkansas u mid-Dipartiment tax-Xjenzi tal-Ikel. Barra minn hekk, l-awturi jixtiequ jirringrazzjaw lil Anitox għall-appoġġ inizjali fil-kitba ta' din ir-reviżjoni.
1. Dibner JJ, Richards JD. L-użu ta' promoturi tat-tkabbir tal-antibijotiċi fl-agrikoltura: storja u mekkaniżmi ta' azzjoni. Poultry Science (2005) 84:634–43. doi: 10.1093/ps/84.4.634
2. Jones FT, Rick SC. Storja tal-iżvilupp u s-sorveljanza antimikrobika fl-għalf tat-tjur. Poultry Science (2003) 82:613–7. doi: 10.1093/ps/82.4.613
3. Broom LJ. Teorija subinibitorja tal-promoturi tat-tkabbir tal-antibijotiċi. Poultry Science (2017) 96:3104–5. doi: 10.3382/ps/pex114
4. Sorum H, L'Abe-Lund TM. Reżistenza għall-antibijotiċi f'batterji li jinġarru mill-ikel—konsegwenzi ta' tfixkil fin-netwerks ġenetiċi batteriċi globali. International Journal of Food Microbiology (2002) 78:43–56. doi: 10.1016/S0168-1605(02)00241-6
5. Van Immerseel F, Cauwaerts K, Devriese LA, Heesebroek F, Ducatel R. Addittivi tal-għalf għall-kontroll tas-Salmonella fl-għalf. Ġurnal Dinji tax-Xjenza tat-Tjur (2002) 58:501–13. doi: 10.1079/WPS20020036
6. Angulo FJ, Baker NL, Olsen SJ, Anderson A, Barrett TJ. L-użu antimikrobjali fl-agrikoltura: il-kontroll tat-trażmissjoni tar-reżistenza antimikrobjali lill-bnedmin. Seminars in Pediatric Infectious Diseases (2004) 15:78–85. doi: 10.1053/j.spid.2004.01.010
7. Lekshmi M, Ammini P, Kumar S, Varela MF. Ambjenti tal-produzzjoni tal-ikel u l-evoluzzjoni tar-reżistenza antimikrobika f'patoġeni umani derivati ​​mill-annimali. Mikrobijoloġija (2017) 5:11. doi: 10.3390/microorganisms5010011
8. Lourenço JM, Seidel DS, Callaway TR. Kapitlu 9: Antibijotiċi u funzjoni tal-imsaren: storja u status attwali. Fi: Ricke SC, ed. It-titjib tas-saħħa tal-imsaren fit-tjur. Cambridge: Burley Dodd (2020). Paġni 189–204. DOI: 10.19103/AS2019.0059.10
9. Rick SC. Nru 8: Iġjene tal-Għalf. Fi: Dewulf J, van Immerzeel F, eds. Bijosigurtà fil-Produzzjoni tal-Annimali u l-Mediċina Veterinarja. Leuven: ACCO (2017). Paġni 144–76.