Javascript bħalissa huwa diżattivat fil-brawżer tiegħek. Xi karatteristiċi ta' dan is-sit elettroniku mhux se jaħdmu meta javascript ikun diżattivat.
Irreġistra bid-dettalji speċifiċi tiegħek u l-mediċina speċifika li tinteressak u aħna nqabblu l-informazzjoni li tipprovdi ma' artikli fid-database estensiva tagħna u nibagħtulek kopja PDF bl-email immedjatament.
Il-granuli Ban-Lan-Gen itaffu l-kolite kronika rikadenti indotta minn dextran sodium sulfate fil-ġrieden billi jimmodulaw il-mikrobijota tal-imsaren u jirrestawraw il-produzzjoni intestinali ta' SCFA Derived-GLP-1
Jiao Peng,1-3,*Li Xi,4,*Zheng Lin,3,5 Duan Lifang,1 Gao Zhengxian,2,5 Diehu,1 Li Jie,6 Li Xiaofeng,6 Shen Xiangchun,5 Xiao Haitao21Università ta' Peking, Sptar ta' Shenzhen, Dipartiment tal-Farmaċija, Shenzhen, Repubblika Popolari taċ-Ċina; 2Ċentru tax-Xjenza tas-Saħħa tal-Università ta' Shenzhen, Skola tal-Farmaċija, Shenzhen, Repubblika Popolari taċ-Ċina; 3Università Medika ta' Guizhou, Ċentru ta' Riċerka tat-Teknoloġija tal-Inġinerija tal-Mediċina Etnika u l-Iżvilupp u l-Applikazzjoni tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża, Ministeru tal-Edukazzjoni, Laboratorju Ewlieni Provinċjali ta' Guizhou tal-Farmaċija, Università Medika ta' Guizhou, Guiyang, Repubblika Popolari taċ-Ċina; 4 Dipartiment tal-Gastroenteroloġija, Sptar ta' Shenzhen tal-Università ta' Peking, Shenzhen, Repubblika Popolari taċ-Ċina; 5 Skola tal-Farmaċija, Università Medika ta' Guizhou, Laboratorju Ewlieni tal-Istat għall-Funzjoni u l-Applikazzjoni tal-Pjanti Mediċinali, Guiyang; 6 Dipartiment tal-Mediċina tal-Laboratorju, Sptar tal-Università ta' Peking Shenzhen, Shenzhen, iċ-Ċina [email protected] Shen Xiangchun, Skola tal-Farmaċija, Università Medika ta' Guizhou, Guizhou, Repubblika Popolari taċ-Ċina, 550004, Email [email protected] Objettiv: It-terapija bbażata fuq GLP-1 hija għażla ġdida ta' trattament għall-marda infjammatorja tal-musrana. Il-granuli Ban-Lan-Gen (BLG) huma formulazzjoni TCM antivirali magħrufa li turi attività anti-infjammatorja potenzjali fit-trattament ta' diversi kundizzjonijiet infjammatorji. Madankollu, l-effett anti-infjammatorju tagħha fuq il-kolite u l-mekkaniżmu ta' azzjoni tagħha għadhom mhumiex ċari. METODI: Biex tiġi stabbilita l-kolite kronika rikadenti indotta minn dextran sodium sulfate (DSS) fil-ġrieden. L-indiċi tal-attività tal-marda, il-markaturi istoloġiċi tal-ħsara, u l-livelli taċ-ċitokini proinfjammatorji twettqu biex jiġi vvalutat l-effett protettiv ta' BLG. L-effetti ta' BLG fuq il-mikrobijota tal-musrana u l-musrana ġew ikkaratterizzati mil-livelli tas-serum GLP-1 u l-espressjoni kolonika ta' Gcg, GPR41, u GRP43, il-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana, il-livelli ta' SCFAs fekali, u r-rilaxx ta' GLP-1 minn infezzjoni primarja. Ċelloli epiteljali tal-kolon tal-ġrieden Produzzjoni ta' GLP-1 derivata minn SCFA. Riżultati: It-trattament b'BLG naqqas b'mod sinifikanti t-telf fil-piż tal-ġisem, id-DAI, it-tqassir tal-kolon, il-ħsara fit-tessut tal-kolon, u l-livelli ta' ċitokini proinfjammatorji ta' TNF-α, IL-1β, u IL-6 fit-tessut tal-kolon. Barra minn hekk, it-trattament b'BLG jista' jirrestawra b'mod sinifikanti l-espressjoni tal-kolon Gcg, GPR41 u GRP43 u l-livelli ta' GLP-1 fis-serum fil-ġrieden tal-kolite, u billi jżid batterji li jipproduċu SCFA bħal Akkermansia u Prevotellaceae_UCG-001, u jnaqqas l-abbundanza ta' batterji bħal Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas u Oscillibacter. Barra minn hekk, it-trattament b'BLG jista' jżid b'mod sinifikanti l-livell ta' SCFAs fl-ippurgar tal-ġrieden tal-kolite. Fl-istess ħin, esperimenti in vitro wrew ukoll li l-estratt tal-ippurgar tal-ġrieden ittrattati b'BLG jista' jistimula ħafna ċ-ċelloli epiteljali tal-kolon żgħar Murine primarji li jnixxu GLP-1. Konklużjonijiet: Dawn is-sejbiet jissuġġerixxu li l-BLG għandu effett kontra l-kolite. Il-BLG għandu l-potenzjal li jiġi żviluppat bħala terapija, għall-inqas parzjalment billi jimmodula l-mikrobijota tal-imsaren u jirrestawra l-produzzjoni intestinali ta' GLP-1 derivata minn SCFA. Mediċini promettenti għall-kolite kronika rikadenti. Kliem ewlieni: kolite, granuli Ban-Lan-Gen, mikrobijota tal-imsaren, aċidi grassi b'katina qasira, GLP-1
Il-kolite ulċerattiva (UC) hija marda infjammatorja fit-tul tal-kolon u r-rektum ikkaratterizzata minn dijarea rikorrenti, uġigħ addominali, telf ta' piż, u ippurgar mukopurulenti bid-demm.1 Riċentement, il-prevalenza tal-UC żdiedet f'pajjiżi li qabel kellhom inċidenza baxxa, inkluża ċ-Ċina, bil-popolarità dejjem tiżdied tal-istili ta' ħajja tal-Punent.2 Din iż-żieda toħloq problemi kbar għas-saħħa pubblika u għandha implikazzjonijiet serji għall-abbiltà tal-pazjenti li jaħdmu u l-kwalità tal-ħajja. Notevolment, il-patoġenesi tal-UC tibqa' fil-biċċa l-kbira mhux ċara, iżda huwa ġeneralment aċċettat li l-ġenetika, il-fatturi ambjentali, il-mikrobijota tal-imsaren, u s-sistema immunitarja kollha jikkontribwixxu għall-iżvilupp tal-UC.3 Anke issa, m'hemm l-ebda kura għall-UC, u l-għan tat-trattament huwa klinikament li jikkontrolla s-sintomi kliniċi, jikkaġuna u jżomm ir-remissjoni, jippromwovi l-fejqan tal-mukoża, u jnaqqas ir-rikorrenza. It-trattamenti klassiċi jinkludu aminosaliċilati, kortikosterojdi, immunosoppressanti, u bijoloġiċi. Madankollu, dawn il-mediċini ma jistgħux jiksbu l-effett mixtieq minħabba d-diversi effetti sekondarji tagħhom.4 Riċentement, ħafna studji ta' każijiet urew li l-mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM) uriet potenzjal kbir biex tgħin biex ittaffi l-UC b'tossiċità baxxa, li tissuġġerixxi li l-iżvilupp ta' terapiji ġodda tat-TCM hija strateġija ta' trattament promettenti għall-UC.5-7
Banlangen Granules (BLG) hija preparazzjoni tradizzjonali tal-mediċina Ċiniża magħmula mill-estratt tal-ilma tal-għerq ta' Banlangen.8 Minbarra l-effikaċja antivirali tagħha, BLG turi attività potenzjali anti-infjammatorja fit-trattament ta' diversi kundizzjonijiet infjammatorji.9,10 Barra minn hekk, ġew iżolati u identifikati glukosinolati (R,S-goitrin, progoitrin, epiprorubin u glucoside minn estratti akwei ta' Radix isatidis) u nukleosidi (hypoxanthine, adenosine, uridine u guanosine) u alkalojdi tal-indigo bħal indigo u indirubin.11,12 Studji preċedenti ddokumentaw sew li l-komposti adenosine, uridine u indirubin juru effetti qawwija kontra l-kolite f'mudelli differenti ta' annimali b'kolite.13-17 Madankollu, ma saru l-ebda studji bbażati fuq l-evidenza biex jevalwaw l-effikaċja ta' BLG fil-kolite. Fl-istudju preżenti, investigajna l-effett protettiv ta' BLG fuq il-kolite kronika rikadenti indotta minn dextran sodium sulfate (DSS) fil-ġrieden C57BL/6 u sibna li L-għoti orali ta' BLG attenwa b'mod sinifikanti l-infjammazzjoni kronika rikaduta tal-kolon indotta minn DSS fil-ġrieden, il-mekkaniżmi regolatorji tagħha huma assoċjati mal-modulazzjoni tal-mikrobijota tal-imsaren u r-restawr tal-produzzjoni ta' peptide-1 simili għal glucagon (GLP-1) derivat mill-imsaren.
Granuli BLG (mingħajr zokkor, Z11020357 approvati mill-NMPA; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Beijing, iċ-Ċina; numru tal-lott: 20110966) inxtraw mill-ispiżeriji. DSS (Piż Molekulari: 36,000–50,000 Daltons) inxtara minn MP Biologicals (Santa Ana, l-Istati Uniti). Sulfasalazine (SASP) (purità ≥ 98%), hematoxylin u eosin inxtraw minn Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, l-Istati Uniti). Kits tal-analiżi Elisa luminex TNF-α, IL-1β u IL-6 tal-ġrieden inxtraw minn R&D systems (Minneapolis, MN, l-Istati Uniti). Aċidu aċetiku, aċidu propjoniku, u aċidu butiriku nxtraw minn Aladdin Industries (Shanghai, iċ-Ċina). Aċidu 2-Ethylbutyric inxtara minn Merck KGaA (Darmstadt, il-Ġermanja).
Ġrieden maskili C57BL/6 ta’ bejn 6 u 8 ġimgħat (piż tal-ġisem 18-22 g) inxtraw minn Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Beijing, iċ-Ċina) u nżammu f’ambjent ta’ 22 ± 2 °C b’ċiklu ta’ dawl/dlam ta’ 12-il siegħa. Il-ġrieden ingħataw dieta standard għall-annimali gerriema b’aċċess liberu għall-ilma tax-xorb għal ġimgħa biex jakklimaw ruħhom għall-ambjent il-ġdid. Il-ġrieden imbagħad ġew maqsuma b’mod każwali f’erba’ gruppi: grupp ta’ kontroll, grupp tal-mudell DSS, grupp ittrattat b’SASP (200 mg/kg, orali) u grupp ittrattat b’BLG (1 g/kg, orali). Kif muri fil-Figura 1A, skont l-istudju preċedenti tagħna, il-kolite kronika rikadenti sperimentali ġiet indotta fil-ġrieden permezz ta’ tliet ċikli ta’ 1.8% DSS għal 5 ijiem, segwiti minn ilma distillat għal 7 ijiem, skont l-istudju preċedenti tagħna. 18-il ġrieden fil-gruppi ttrattati b’SASP u BLG ġew ittrattati b’SASP u BLG, rispettivament, kuljum mill-jum 0. Skont esperimenti preliminari, id-doża ta’ BLG ġiet issettjata għal 1 g/kg. Sadanittant, id-doża ta' SASP ġiet issettjata għal 200 mg/Kg skont il-letteratura.4 Il-gruppi ta' kontroll u tal-mudell DSS irċevew l-istess volum ta' ilma matul l-esperiment kollu.
Figura 1 BLG ittejjeb il-kolite kronika rikadenti indotta minn DSS fil-ġrieden. (A) Disinn sperimentali ta' kolite kronika rikorrenti u trattament, (B) bidla fil-piż tal-ġisem, (C) punteġġ tal-indiċi tal-attività tal-marda (DAI), (D) tul tal-kolon, (E) immaġni rappreżentattiva tal-kolon, (F) tebgħa H&E tal-kolon (ingrandiment, ×100) u (G) punteġġ istoloġiku. Id-dejta hija ppreżentata bħala medja ± SEM (n = 6). ##p < 0.01 jew ###p < 0.001 vs grupp ta' kontroll (Con); *p < 0.05 jew **p < 0.01 jew ***p < 0.001 vs grupp DSS.
Il-piż tal-ġisem, il-konsistenza tal-ippurgar, u l-fsada rettali ġew irreġistrati kuljum. L-indiċi tal-attività tal-marda (DAI) ġie determinat billi ġew ikkombinati punteġġi tal-piż tal-ġisem, il-konsistenza tal-ippurgar, u l-fsada rettali kif deskritt qabel.19 Fi tmiem l-esperiment, il-ġrieden kollha ġew ewtanizzati u nġabru d-demm, l-ippurgar u l-kolon għal aktar esperimenti.
It-tessut tal-kolon ġie ffissat bil-formalina u inkorporat fil-paraffina. Saru sezzjonijiet ta' 5 mikroni u ġew imtebbgħin b'ematoxylin-eosin (H&E), imbagħad ġew mgħottija u mkejla kif deskritt qabel.19
L-RNA totali tat-tessut tal-kolon ġie estratt bir-reaġent Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA), segwit minn estrazzjoni tas-cDNA b'reverse transcriptase (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Ġappun). Il-PCR kwantitattiv twettaq bl-użu ta' sistema PCR f'ħin reali b'SYBR Green Master (Roche, Basel, Svizzera). It-traskrizzjonijiet tal-ġeni fil-mira ġew normalizzati għal β-actin u d-dejta ġiet analizzata bl-użu tal-metodu 2-ΔΔCT. Is-sekwenzi tal-primer tal-ġeni huma murija fit-Tabella 1.
L-iżolament u l-kultura taċ-ċelluli epiteljali tal-kolon tal-ġrieden primarji twettqu kif deskritt qabel.20 Fil-qosor, il-kolon ta’ ġrieden ta’ bejn 6 u 8 ġimgħat l-ewwel tneħħew wara s-sagrifiċċju permezz ta’ dislokazzjoni ċervikali, imbagħad infetħu lonġitudinalment, ġew ittrattati b’Hanks Balanced Salt Solution (HBSS, mingħajr kalċju u manjesju) u maqtugħin f’biċċiet żgħar ta’ 0.5-1 mm. Sussegwentement, it-tessuti ġew diġeriti b’0.4 mg/mL collagenase XI (Sigma, Poole, UK) f’mezz DMEM ħieles u ċċentrifugati fi 300 xg għal 5 minuti f’temperatura tal-kamra. Erġa’ sospendi l-gerbub f’mezz DMEM (supplimentat b’10% serum bovin fetali, 100 Unità/mL peniċillina, u 100 µg/mL streptomycin) fi 37 °C u għaddi minn malja tan-najlon (daqs tal-pori ~250 µm). Alikwoti taċ-ċelluli epiteljali tal-kolon tqiegħdu fi platti b’qiegħ tal-ħġieġ u ġew inkubati b’aċidu aċetiku, aċidu propjoniku, aċidu butiriku, u estratti fekali tal-ġrieden għal Sagħtejn f'temperatura ta' 37°C, 5% CO2.
It-tessut tal-kolon ġie omoġenizzat bil-PBS, u l-livelli taċ-ċitokini IL-6, TNF-α u IL-1β fit-tessut tal-kolon ġew skoperti bl-użu ta' kits tal-assaġġ luminex ELISA (R&D systems, Minneapolis, MN, USA). Bl-istess mod, il-livelli ta' GLP-1 fis-serum u fil-mezz tal-kultura taċ-ċelloli epiteljali tal-kolon tal-ġrieden primarji ġew determinati b'kit ELISA (Bioswamp, Wuhan, iċ-Ċina) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur.
Id-DNA totali mill-ħmieġ ġie estratt bl-użu ta' kit ta' estrazzjoni tad-DNA (Tiangen, iċ-Ċina). Il-kwalità u l-kwantità tad-DNA tkejlu fil-proporzjonijiet ta' 260 nm/280 nm u 260 nm/230 nm, rispettivament. Sussegwentement, bl-użu ta' kull DNA estratt bħala mudell, primers speċifiċi 338F (ACTCCTACGGGAGGCAG) u 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) intużaw biex jamplifikaw ir-reġjuni V3-V4 tal-ġene 16S rRNA f'reġjuni differenti. Il-prodotti tal-PCR ġew purifikati bl-użu tal-QIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN, il-Ġermanja), kwantifikati permezz ta' PCR f'ħin reali, u sekwenzati bl-użu tal-pjattaforma tas-sekwenzar IlluminaMiseq PE300 (Illumina Inc., CA, l-Istati Uniti). Għall-analiżi bijoinformatika, l-ipproċessar tad-dejta twettaq wara protokolli rrappurtati qabel.21,22 Fil-qosor, uża Cutadapt (V1.9.1) biex tiffiltra fajls espressi mhux ipproċessati. L-OTUs ġew miġbura flimkien bl-użu ta' UPARSE (verżjoni 7.0.1001) b'limitu ta' similarità ta' 97%, u UCHIME intuża biex jitneħħew is-sekwenzi kimeriċi. L-analiżi u l-klassifikazzjoni tal-kompożizzjoni tal-komunità twettqu bl-użu tal-klassifikatur RDP (http://rdp.cme.msu.edu/) ibbażat fuq id-database tal-ġeni tal-RNA ribosomali SILVA.
Il-livelli ta' aċidi grassi b'katina qasira (aċidu aċetiku, aċidu propjoniku, u aċidu butiriku) tkejlu kif deskritt qabel minn Tao et al., b'xi modifiki.23 Fil-qosor, 100 mg ta' ħmieġ ġew sospiżi l-ewwel f'0.4 mL ta' ilma dejonizzat, segwit minn 0.1 mL ta' 50% aċidu sulfuriku u 0.5 mL ta' aċidu 2-etilbutiriku (standard intern), imbagħad omoġenizzati u msaħħna f'4°C. Iċċentrifuga b'12,000 rpm għal 15-il minuta f'C. Is-supernatant ġie estratt b'0.5 mL ta' etere u injettat fil-GC għall-analiżi. Għall-analiżi tal-kromatografija tal-gass (GC), il-kampjuni ġew analizzati bl-użu ta' kromatografu tal-gass GC-2010 Plus (Shimadzu, Inc.) mgħammar b'ditekter tal-jonizzazzjoni tal-fjamma (FID). Is-separazzjoni nkisbet bl-użu ta' kolonna ZKAT-624, 30 m × 0.53 mm × 0.3 μm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., iċ-Ċina). Id-dejta nkisbet bl-użu ta' softwer tas-soluzzjoni GC (Shimadzu, Inc.). Il-proporzjon tal-qsim kien 10:1, il-gass trasportatur kien nitroġenu, u r-rata tal-fluss kienet ta' 6 mL/min. Il-volum tal-injezzjoni kien ta' 1 μL. It-temperatura tal-injettur u tad-ditekter kienet ta' 300°C. It-temperatura tal-forn inżammet f'140°C għal 13.5 minuti, imbagħad żdiedet għal 250°C b'rata ta' 120°C/min; it-temperatura nżammet għal 5 minuti.
Id-dejta hija ppreżentata bħala medja ± żball standard tal-medja (SEM). Is-sinifikat tad-dejta ġie vvalutat permezz ta' ANOVA b'direzzjoni waħda segwita mit-test ta' firxa multipla ta' Duncan. Is-softwer GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA) intuża għall-kalkoli kollha u p < 0.05 kien ikkunsidrat statistikament sinifikanti.
Huwa magħruf sew li l-UC hija marda kronika ta' kolite rikaduttiva b'uġigħ addominali qawwi, dijarea u fsada. Għalhekk, ġiet stabbilita kolite kronika rikaduttiva indotta minn DSS fil-ġrieden biex tiġi evalwata l-effikaċja kontra l-kolite ta' BLG (Fig. 1A). Meta mqabbla mal-grupp ta' kontroll, il-ġrieden fil-grupp tal-mudell DSS kellhom piż tal-ġisem imnaqqas b'mod sinifikanti u DAI ogħla, u dawn il-bidliet ġew imreġġa' lura b'mod sinifikanti wara 24 jum ta' trattament b'BLG (Figura 1B u C). It-tqassir tal-kolon huwa karatteristika importanti tal-UC. Kif muri fil-Figuri 1D u E, it-tul tal-kolon tal-ġrieden li rċevew DSS tqassar b'mod sinifikanti, iżda tneħħa bit-trattament b'BLG. Sussegwentement, saret analiżi istopatoloġika biex tiġi vvalutata l-infjammazzjoni tal-kolon. L-immaġini mtebbgħin b'H&E u l-punteġġi patoloġiċi wrew li l-għoti ta' DSS waqqaf b'mod sinifikanti l-arkitettura tal-kolon u rriżulta fil-qerda tal-kripta, filwaqt li t-trattament b'BLG naqqas b'mod sinifikanti l-qerda tal-kripta u l-punteġġi patoloġiċi (Figura 1F u G). Ta' min jinnota li l-effett protettiv ta' BLG f'doża ta' 1 g/Kg kien komparabbli ma' dak ta' SASP f'doża ta' 1 g/Kg. doża ta' 200 mg/Kg. Kollettivament, dawn is-sejbiet jissuġġerixxu li l-BLG huwa effettiv fit-tnaqqis tas-severità tal-kolite rikadenti kronika indotta minn DSS fil-ġrieden.
TNF-α, IL-1β u IL-6 huma markaturi infjammatorji importanti ta' infjammazzjoni tal-kolon. Kif muri fil-Figura 2A, DSS wassal għal żieda sinifikanti fl-espressjoni tal-ġeni ta' TNF-α, IL-1β u IL-6 fil-kolon meta mqabbel mal-grupp ta' kontroll. L-għoti ta' BLG jista' jreġġa' lura b'mod sinifikanti dawn il-bidliet medjati mid-DSS. Imbagħad, użajna ELISA biex niddeterminaw il-livelli taċ-ċitokini infjammatorji TNF-α, IL-1β, u IL-6 fit-tessut tal-kolon. Ir-riżultati wrew ukoll li l-livelli koloniċi ta' TNF-α, IL-1β, u IL-6 żdiedu b'mod sinifikanti fil-ġrieden ittrattati b'DSS, filwaqt li t-trattament b'BLG taffa dawn iż-żidiet (Figura 2B).
Figura 2 BLG jinibixxi l-espressjoni tal-ġeni u l-produzzjoni taċ-ċitokini proinfjammatorji TNF-α, IL-1β u IL-6 fil-kolon ta' ġrieden ittrattati b'DSS. (A) Espressjoni tal-ġeni fil-kolon ta' TNF-α, IL-1β u IL-6; (B) livelli ta' proteini fil-kolon ta' TNF-α, IL-1β u IL-6. Id-dejta hija ppreżentata bħala medja ± SEM (n = 4–6). #p < 0.05 jew ##p < 0.01 jew ###p < 0.001 vs grupp ta' kontroll (Con); *p < 0.05 jew **p < 0.01 vs grupp DSS.
Id-disbjożi intestinali hija kritika fil-patoġenesi tal-UC.24 Biex jiġi investigat jekk BLG jimmodulax il-mikrobijota tal-imsaren tal-ġrieden ittrattati b'DSS, sar sekwenzar ta' 16S rRNA biex jiġi analizzat il-komunità batterjali tal-kontenut tal-imsaren. Id-dijagramma ta' Venn turi li t-tliet gruppi jaqsmu 385 OTU. Fl-istess ħin, kull grupp kellu OTUs uniċi (Fig. 3A). Barra minn hekk, l-indiċi Chao1 u l-indiċi Shannon murija fil-Figura 3B u C urew li d-diversità tal-komunità tal-mikrobijota tal-imsaren kienet imnaqqsa fil-ġrieden ittrattati b'BLG, billi l-indiċi Shannon kien imnaqqas b'mod sinifikanti fil-grupp ittrattat b'BLG. L-analiżi tal-komponenti prinċipali (PCA) u l-analiżi tal-koordinati prinċipali (PCoA) intużaw biex jiddeterminaw mudelli ta' raggruppament fost it-tliet gruppi u wrew li l-istruttura tal-komunità tal-ġrieden ittrattati b'DSS kienet separata b'mod ċar wara t-trattament b'BLG (Figura 3D u E). Din id-dejta tissuġġerixxi li t-trattament b'BLG affettwa b'mod sinifikanti l-istruttura tal-komunità tal-ġrieden b'kolite indotta minn DSS.
Figura 3 BLG jibdel id-diversità tal-mikrobijota tal-imsaren fil-ġrieden b'kolite indotta minn DSS. (A) Dijagramma ta' Venn tal-OTU, (B) Indiċi Chao1, (C) Indiċi ta' rikkezza ta' Shannon, (D) Plott tal-punteġġ tal-Analiżi tal-Komponent Prinċipali (PCA) tal-OTU, (E) Figura tal-punteġġ tal-Analiżi tal-Koordinati Prinċipali tal-OTU (PCoA). Id-dejta hija ppreżentata bħala medja ± SEM (n = 6). **p < 0.01 vs grupp DSS.
Biex nivvalutaw bidliet speċifiċi fil-mikrobijota fekali, analizzajna l-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-imsaren fil-livelli tassonomiċi kollha. Kif muri fil-Figura 4A, il-phyla ewlenin fil-gruppi kollha kienu Firmicutes u Bacteroidetes, segwiti minn Verrucomicrobia. L-abbundanzi relattivi ta' Firmicutes u l-proporzjonijiet Firmicutes/Bacteroidetes żdiedu b'mod sinifikanti fil-komunitajiet mikrobjali fekali tal-ġrieden ittrattati bid-DSS meta mqabbla mal-ġrieden ta' kontroll, u dawn il-bidliet ġew imreġġa' lura b'mod sinifikanti wara t-trattament b'BLG. B'mod partikolari, it-trattament b'BLG żied b'mod sinifikanti l-abbundanza relattiva ta' Verrucobacterium fl-ippurgar tal-ġrieden b'kolite indotta mid-DSS. Fil-livell tad-dar, il-komunitajiet mikrobjali fekali kienu okkupati minn Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae u Prevotellaceae (Fig. 4B). Meta mqabbel mal-grupp DSS, it-tnaqqis ta' BLG żied l-abbundanza ta' Akkermansiaceae, iżda naqqas l-abbundanza ta' Lachnospiraceae u Ruminococcaceae. Notevolment, fil-livell tal-ġeneru, l-ippurgar Il-mikrobijota kienet okkupata minn Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia u Prevotellaceae_UCG-001 (Fig. 4C). Din is-sejba wriet ukoll li t-trattament BLG effettivament ireġġa' lura l-iżbilanċ tal-mikrobijota b'reazzjoni għall-isfida tad-DSS, ikkaratterizzat minn tnaqqis f'Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas u Oscillibacter, u żieda f'Akkermansia u Prevotellaceae_UCG-001.
Figura 4 BLG jibdel l-abbundanza tal-mikrobijota tal-imsaren fil-ġrieden bil-kolite indotta minn DSS. (A) Abbundanza ta' mikrobijota tal-imsaren fil-livell tal-filu; (B) Abbundanza ta' mikrobijota tal-imsaren fil-livell tal-familja; (Ċ) Abbundanza ta' mikrobijota tal-imsaren fil-livell tal-ġeneru. Id-dejta hija ppreżentata bħala medja ± SEM (n = 6). #p < 0.05 jew ###p < 0.001 vs grupp ta' kontroll (Con); *p < 0.05 jew **p < 0.01 jew ***p < 0.001 vs grupp DSS.
Meta wieħed iqis li l-aċidi grassi b'katina qasira (SCFAs) huma l-metaboliti ewlenin ta' Akkermansia u Prevotellaceae_UCG-001, filwaqt li l-aċetat, il-propjonat u l-butirat huma l-SCFAs l-aktar abbundanti fil-lumen intestinali, 25-27 għadna fl-istudju tagħna. Kif muri fil-Figura 5, il-konċentrazzjonijiet ta' aċetat, propionat u butirat fl-ippurgar tnaqqsu b'mod sinifikanti fil-grupp ittrattat bid-DSS, filwaqt li t-trattament bil-BLG seta' fil-biċċa l-kbira jrażżan dan it-tnaqqis.
Figura 5. BLG iżid il-livelli ta' SCFAs fl-ippurgar tal-ġrieden b'kolite indotta minn DSS. (A) Kontenut ta' aċidu aċetiku fl-ippurgar; (B) kontenut ta' aċidu propjoniku fl-ippurgar; (C) kontenut ta' aċidu butiriku fl-ippurgar. Id-dejta hija ppreżentata bħala medja ± SEM (n = 6). #p < 0.05 jew ##p < 0.01 vs grupp ta' kontroll (Con); *p < 0.05 jew **p < 0.01 vs grupp DSS.
Aħna kkalkulajna wkoll il-koeffiċjent ta' korrelazzjoni ta' Pearson bejn l-SCFA differenzjali fil-livell tal-ġeneru u l-mikrobijota fekali. Kif muri fil-Figura 6, Akkermansia kienet korrelata b'mod pożittiv mal-produzzjoni ta' aċidu propjoniku (Pearson = 0.4866) u aċidu butiriku (Pearson = 0.6192). B'kuntrast, kemm Enteromonas kif ukoll Oscillobacter kienu assoċjati b'mod negattiv mal-produzzjoni ta' aċetat, b'koeffiċjenti ta' Pearson ta' 0.4709 u 0.5104, rispettivament. Bl-istess mod, Ruminococcaceae_UCG-014 kienet korrelata b'mod negattiv mal-produzzjoni ta' aċidu propjoniku (Pearson = 0.4508) u aċidu butiriku (Pearson = 0.5842), rispettivament.
Figura 6 Analiżi tal-korrelazzjoni ta' Pearson bejn SCFAs differenzjali u mikrobi tal-kolon. (A) Enteromonas bl-aċidu aċetiku; (B) Baċillu tal-konkussjoni bl-aċidu aċetiku; (C) Akkermansia vs aċidu propjoniku; (D) Ruminococcus_UCG-014 bl-aċidu propjoniku; (E) Akkermansia bl-aċidu butiriku; (F) Ruminococcus _UCG-014 bl-aċidu butiriku.
Il-peptide-1 li jixbah il-glukagon (GLP-1) huwa prodott post-traduzzjonali speċifiku għat-tip ta' ċellula tal-proglukagon (Gcg) bi proprjetajiet anti-infjammatorji.28 Kif muri fil-Figura 7, id-DSS wassal għal tnaqqis sinifikanti fl-espressjoni tal-mRNA tal-Gcg. It-trattament tal-kolon u l-BLG seta' jreġġa' lura b'mod sinifikanti t-tnaqqis tal-Gcg indott mid-DSS meta mqabbel mal-grupp ta' kontroll (Fig. 7A). Fl-istess ħin, il-livell ta' GLP-1 fis-serum tnaqqas b'mod sinifikanti fil-grupp ittrattat bid-DSS, u t-trattament bil-BLG seta' jipprevjeni fil-parti l-kbira dan it-tnaqqis (Fig. 7B). Peress li l-aċidi grassi b'katina qasira jistgħu jistimulaw is-sekrezzjoni tal-GLP-1 permezz tal-attivazzjoni tar-riċettur 43 akkoppjat mal-proteina G (GRP43) u r-riċettur 41 akkoppjat mal-proteina G (GRP41), eżaminajna wkoll il-GPR41 u l-GRP43 fil-kolon tal-ġrieden bil-kolite u sibna li l-espressjoni tal-mRNA tal-kolon ta' GRP43 u GPR41 kienet imnaqqsa b'mod sinifikanti wara l-isfida tad-DSS, u t-trattament bil-BLG seta' jsalva dawn it-tnaqqis b'mod effettiv (Figura 7C u D).
Figura 7 BLG iżid il-livelli tas-serum GLP-1 u l-espressjoni tal-mRNA tal-kolon Gcg, GPR41 u GRP43 fil-ġrieden ittrattati b'DSS. (A) Espressjoni tal-mRNA ta' Gcg fit-tessut tal-kolon; (B) Livell ta' GLP-1 fis-serum; (C) Espressjoni tal-mRNA ta' GPR41 fit-tessut tal-kolon; (D) Espressjoni tal-mRNA ta' GPR43 fit-tessut tal-kolon. Id-dejta hija ppreżentata bħala medja ± SEM (n = 5–6). #p < 0.05 jew ##p < 0.01 vs grupp ta' kontroll (Con); *p < 0.05 vs grupp DSS.
Peress li t-trattament bil-BLG seta' jżid il-livelli tas-serum ta' GLP-1, l-espressjoni tal-mRNA tal-Gcg fil-kolon, u l-livelli ta' SCFA fl-ippurgar fil-ġrieden ittrattati b'DSS, eżaminajna aktar l-aċetat, il-propjonat, u l-butirat kif ukoll mill-ġrieden ta' kontroll (F-Con), DSS colitis (F-Con) -DSS) u ġrieden ittrattati b'BLG colitis (F-BLG) fuq ir-rilaxx ta' GLP-1 minn ċelluli epiteljali tal-kolon primarji tal-ġrieden. Kif muri fil-Figura 8A, iċ-ċelluli epiteljali tal-kolon primarji tal-ġrieden ittrattati b'2 mM aċidu aċetiku, aċidu propjoniku, u aċidu butiriku, rispettivament, stimulaw b'mod sinifikanti r-rilaxx ta' GLP-1, konsistenti ma' studji preċedenti.29,30 Bl-istess mod, l-F-Con, l-F-DSS, u l-F-BLG kollha (ekwivalenti għal 0.25 g ta' ippurgar) stimulaw ħafna r-rilaxx ta' GLP-1 minn ċelluli epiteljali tal-kolon primarji tal-ġrieden. Notevolment, l-ammont ta' GLP-1 rilaxxat miċ-ċelluli epiteljali tal-kolon primarji tal-ġrieden ittrattati b'F-DSS kien ħafna aktar baxx minn dak taċ-ċelluli epiteljali tal-kolon primarji tal-ġrieden ittrattati b'F-Con u F-BLG. Ċelloli epiteljali tal-kolon tal-ġrieden. (Figura 8B). Din id-dejta tissuġġerixxi li t-trattament b'BLG irrestawra b'mod sinifikanti l-produzzjoni intestinali ta' GLP-1 derivata minn SCFA.
Figura 8 SCFA derivat minn BLG jistimula r-rilaxx ta' GLP-1 minn ċelluli epiteljali tal-kolon primarji tal-ġrieden. (A) L-aċidu aċetiku, l-aċidu propjoniku, u l-aċidu butiriku stimulaw ir-rilaxx ta' GLP-1 minn ċelluli epiteljali tal-kolon primarji tal-ġrieden; (B) estratti fekali F-Con, F-DSS u F-BLG stimulaw ċelluli epiteljali tal-kolon primarji tal-ġrieden Ammont ta' GLP-1 rilaxxat. Alikwoti ta' ċelluli epiteljali tal-kolon tqiegħdu fi platti Petri b'qiegħ tal-ħġieġ u ttrattati b'2 mM aċidu aċetiku, aċidu propjoniku, aċidu butiriku, u estratti fekali F-Con, F-DSS, u F-BLG (ekwivalenti għal 0.25 g ħmieġ), rispettivament. Sagħtejn f'37°C, 5% CO2, rispettivament. L-ammont ta' GLP-1 rilaxxat minn ċelluli epiteljali tal-kolon primarji tal-ġrieden ġie skopert permezz ta' ELISA. Id-dejta hija ppreżentata bħala medja ± SEM (n = 3).#p < 0.05 jew ##p < 0.01 vs. vojt jew F-Con; *p < 0.05 vs. F-DSS.
Abbrevjazzjonijiet: Ace, aċidu aċetiku; Pro, aċidu propjoniku; madankollu, aċidu butiriku; F-Con, estratt fekali minn ġrieden ta' kontroll; F-DSS, estratt fekali minn ġrieden bil-kolite; F-BLG, minn kolon ittrattat b'BLG Estratti fekali ta' ġrieden infjammatorji.
Elenkata mill-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa bħala marda refrattorja, il-UC qed issir periklu globali; Madankollu, metodi effettivi għat-tbassir, il-prevenzjoni u t-trattament tal-marda għadhom limitati. Għalhekk, hemm bżonn urġenti li jiġu esplorati u żviluppati strateġiji terapewtiċi ġodda sikuri u effettivi għall-UC. Il-preparazzjonijiet tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża huma għażla promettenti għaliex ħafna preparazzjonijiet tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża ntwerew li huma effettivi fit-trattament tal-UC fil-popolazzjoni Ċiniża matul is-sekli, u huma kollha organiċi bijoloġiċi u materjali naturali li l-aktar ma jagħmlux ħsara lill-bnedmin u lill-annimali.31,32 Dan l-istudju kellu l-għan li jfittex preparazzjoni tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża sikura u effettiva għat-trattament tal-UC u li jesplora l-mekkaniżmu ta' azzjoni tagħha. Il-BLG hija formula erbali Ċiniża magħrufa sew użata biex tikkura l-influwenza.8,33 Xogħol fil-laboratorju tagħna u f'oħrajn wera li l-indigo, prodott tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża pproċessat mill-istess materja prima bħall-BLG, juri effikaċja sinifikanti fit-trattament tal-UC fil-bnedmin u fl-annimali.4,34 Madankollu, l-effetti kontra l-kolite tal-BLG u l-effetti tiegħu Il-mekkaniżmu mhux ċar. Fl-istudju attwali, ir-riżultati tagħna juru li l-BLG effettivament itaffi l-infjammazzjoni tal-kolon indotta mid-DSS, li hija assoċjata mal-modulazzjoni tal-mikrobijota tal-imsaren u restawr tal-produzzjoni ta' GLP-1 derivata mill-imsaren.
Huwa magħruf sew li l-UC hija kkaratterizzata minn perjodi ta’ rikaduta b’karatteristiċi kliniċi tipiċi, bħal telf ta’ piż, dijarea, fsada rettali, u ħsara estensiva fil-mukoża tal-kolon.35 Għalhekk, il-kolite kronika rikaduta ngħatat billi ngħataw tliet ċikli ta’ 1.8% DSS għal ħamest ijiem, segwiti minn sebat ijiem ta’ ilma tax-xorb. Kif muri fil-Figura 1B, it-telf ta’ piż li jvarja u l-punteġġi DAI indikaw induzzjoni b’suċċess ta’ kolite kronika rikaduta. Il-ġrieden fil-grupp ittrattat b’BLG urew irkupru ’l fuq mill-jum 8, li kien sinifikament differenti mill-jum 24. L-istess bidliet ġew osservati wkoll fil-punteġġ DAI, li jissuġġerixxu titjib fit-titjib kliniku tal-kolite. F’termini ta’ ħsara fil-kolon u status infjammatorju, it-tul tal-kolon, il-ħsara fit-tessut tal-kolon, u l-espressjoni tal-ġeni u l-produzzjoni taċ-ċitokini proinfjammatorji TNF-α, IL-1β, u IL-6 fit-tessut tal-kolon tjiebu wkoll ħafna wara t-trattament b’BLG. Kollettivament, dawn ir-riżultati juru b’mod ċar li BLG huwa effettiv fit-trattament tal-kolite kronika rikaduta fil-ġrieden.
Kif jeżerċita l-BLG l-effetti farmakoloġiċi tiegħu? Bosta studji preċedenti wrew li l-mikrobijota tal-imsaren għandha rwol ewlieni fil-patoġenesi tal-UC, u terapiji bbażati fuq il-mikrobijoma u mmirati lejn il-mikrobijoma ħarġu bħala strateġija attraenti ħafna għat-trattament tal-UC. Fl-istudju preżenti, wrejna li t-trattament bil-BLG irriżulta f'bidliet sinifikanti fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-imsaren, li jissuġġerixxi li l-effett protettiv tal-BLG kontra l-kolite indotta mid-DSS huwa relatat mal-modulazzjoni tal-mikrobijota tal-imsaren. Din l-osservazzjoni hija konsistenti man-nozzjoni li l-ipprogrammar mill-ġdid tal-omeostażi tal-mikrobijota tal-imsaren huwa approċċ importanti biex wieħed jifhem l-effikaċja tal-preparazzjonijiet tat-TCM.36,37 Notevolment, l-Akkermansia hija batterju Gram-negattiv u strettament anerobiku li jgħix fis-saff tal-mukus tal-imsaren, li jiddegrada l-muċini, jipproduċi l-aċidu propjoniku, jistimula d-divrenzjar taċ-ċelluli goblet, u jżomm il-funzjoni tal-mukoża tal-integrità tal-barriera.26 Dejta klinika u tal-annimali multipli tissuġġerixxi li l-Akkermansia hija assoċjata ħafna ma' mukoża b'saħħitha,38 u l-amministrazzjoni orali ta' Akkermansia spp. jista' jtejjeb b'mod sinifikanti l-infjammazzjoni tal-mukosa.39 Id-dejta attwali tagħna tissuġġerixxi li l-abbundanza relattiva ta' Akkermansia tiżdied b'mod sinifikanti wara t-trattament b'BLG. Barra minn hekk, Prevotellaceae_UCG-001 huwa batterju li jipproduċi SCFA.27 Studji multipli wrew li Prevotellaceae_UCG-001 instab f'abbundanza relattiva baxxa fl-ippurgar ta' annimali b'kolite.40,41 Id-dejta preżenti tagħna turi wkoll li t-trattament b'BLG jista' jżid b'mod sinifikanti l-abbundanza relattiva ta' Prevotellaceae_UCG-001 fil-kolon ta' ġrieden ittrattati b'DSS. B'kuntrast, Oscillibacter huwa batterju mesofiliku u strettament anerobiku.42 irrapporta li l-abbundanza relattiva ta' Oscillibacter żdiedet b'mod sinifikanti fil-ġrieden b'UC u kienet korrelata b'mod pożittiv b'mod sinifikanti mal-livelli ta' IL-6 u IL-1β u l-punteġġi patoloġiċi.43,44 Notevolment, it-trattament b'BLG naqqas b'mod sinifikanti l-abbundanza relattiva ta' Oscillibacter fl-ippurgar ta' ġrieden ittrattati b'DSS. Notevolment, dawn il-batterji mibdula b'BLG kienu l-aktar batterji li jipproduċu SCFA. Bosta studji preċedenti wrew il-potenzjal benefiċjarju effetti tal-SCFAs fuq l-infjammazzjoni tal-kolon u l-protezzjoni tal-integrità epiteljali intestinali.45,46 Id-dejta preżenti tagħna osservat ukoll li l-konċentrazzjonijiet ta' aċetat, propionat u butirat tal-SCFA fl-ippurgar ittrattat bid-DSS żdiedu ħafna fil-ġrieden ittrattati bil-BLG. Meħuda flimkien, dawn is-sejbiet juru b'mod ċar li t-trattament bil-BLG jista' jtejjeb b'mod effettiv il-batterji li jipproduċu SCFA indotti mid-DSS fil-ġrieden b'kolite rikaduttorja kronika.
GLP-1 huwa inkretin prodott l-aktar fl-ileum u l-kolon u għandu rwol importanti fid-dewmien tat-tbattil gastriku u fit-tnaqqis tal-glukożju fid-demm wara l-ikel.47 L-evidenza tissuġġerixxi li d-dipeptidyl peptidase (DPP)-4, agonist tar-riċettur GLP-1, u nanomediċina GLP-1 jistgħu jtaffu b'mod effettiv l-infjammazzjoni intestinali fil-ġrieden.48-51 Kif irrappurtat fi studji preċedenti, konċentrazzjonijiet għoljin ta' SCFA kienu assoċjati ma' livelli ta' GLP-1 fil-plażma fil-bnedmin u l-ġrieden. 52 Id-dejta attwali tagħna turi li wara t-trattament b'BLG, il-livelli ta' GLP-1 fis-serum u l-espressjoni tal-mRNA ta' Gcg żdiedu b'mod sinifikanti. Bl-istess mod, is-sekrezzjoni ta' GLP-1 żdiedet b'mod sinifikanti fil-kulturi koloniċi wara stimulazzjoni b'estratti fekali minn ġrieden tal-kolite ttrattati b'BLG meta mqabbla ma' stimulazzjoni b'estratti fekali minn ġrieden tal-kolite ttrattati b'DSS. Kif jaffettwaw l-SCFAs ir-rilaxx ta' GLP-1? Gwen Tolhurst et al. irrapporta li l-SCFA jista' jistimula s-sekrezzjoni ta' GLP-1 permezz ta' GRP43 u GPR41.29 Id-dejta preżenti tagħna turi wkoll li t-trattament blg iżid b'mod sinifikanti l-espressjoni tal-mRNA ta' GRP43 u GPR41 fil-kolon tal-ġrieden ittrattati b'DSS. Din id-dejta tissuġġerixxi li t-trattament blg jista' jirrestawra l-produzzjoni ta' GLP-1 promossa mill-SCFA billi jattiva GRP43 u GPR41.
BLG hija mediċina mingħajr riċetta (OTC) fit-tul fiċ-Ċina. Id-doża massima tollerata ta' BLG fil-ġrieden Kunming hija ta' 80g/Kg, u ma ġiet osservata l-ebda tossiċità akuta.53 Bħalissa, id-doża rakkomandata ta' BLG (mingħajr zokkor) fil-bnedmin hija ta' 9-15 g/kuljum (3 darbiet kuljum). L-istudju tagħna wera li BLG f'1g/Kg tejjeb il-kolite kronika rikadenti indotta minn DSS fil-ġrieden. Din id-doża hija qrib id-doża ta' BLG użata klinikament. L-istudju tagħna sab ukoll li l-mekkaniżmu ta' azzjoni tiegħu huwa medjat, għall-inqas parzjalment, minn alterazzjonijiet fil-mikrobijota tal-imsaren, speċifikament batterji li jipproduċu SCFA, bħal Akkermansia u Prevotellaceae_UCG-001, biex jirrestawraw il-produzzjoni ta' GLP-1 derivata mill-imsaren. Dawn is-sejbiet jissuġġerixxu li BLG jistħoqqlu aktar konsiderazzjoni bħala aġent terapewtiku potenzjali għat-trattament kliniku tal-kolite. Madankollu, il-mekkaniżmu eżatt li bih jimmodula l-mikrobijota tal-imsaren għad irid jiġi kkonfermat minn ġrieden b'defiċjenza ta' mikrobijota u trapjant ta' batterji fekali.
Ace, aċidu aċetiku; but, aċidu butiriku; BLG, pandan; DSS, dextran sodium sulfate; DAI, indiċi tal-attività tal-marda; DPP, dipeptidyl peptidase; FID, ditector tal-jonizzazzjoni tal-fjamma; F-Con, kontroll Estratti fekali tal-ġrieden; F-DSS, estratti fekali ta' ġrieden bil-kolite DSS; F-BLG, estratti fekali ta' ġrieden bil-kolite ttrattati b'BLG; GLP-1, peptide-1 simili għall-glucagon; Gcg, glucagon; kromatografija tal-gass, kromatografija tal-gass; GRP43, riċettur 43 akkoppjat mal-proteina G; GRP41, riċettur 41 akkoppjat mal-proteina G; H&E, ematoxylin-eosin; HBSS, Soluzzjoni Bilanċjata tal-Melħ ta' Hanks; OTC, OTC; PCA, analiżi tal-komponenti prinċipali; PCoA, analiżi tal-koordinati prinċipali; Pro, aċidu propjoniku; SASP, sulfasalazine; SCFA, aċidi grassi b'katina qasira; Mediċina Ċiniża, mediċina tradizzjonali Ċiniża; UC, kolite ulċerattiva.
Il-protokolli sperimentali kollha ġew approvati mill-Kumitat tal-Etika tal-Annimali taċ-Ċentru Mediku tal-Università ta' Peking Shenzhen-Hong Kong University of Science and Technology (Shenzhen, iċ-Ċina) skont il-Linji Gwida Istituzzjonali u r-Regolamenti tal-Annimali (numru tal-etika A2020157).
L-awturi kollha taw kontribuzzjonijiet sinifikanti għall-konċepiment u d-disinn, l-akkwist tad-dejta, jew l-analiżi u l-interpretazzjoni tad-dejta; ipparteċipaw fl-abbozzar tal-artiklu jew fir-reviżjoni kritika ta' kontenut intellettwali importanti; qablu li jissottomettu l-manuskritt lir-rivista attwali; finalment approvaw il-verżjoni għall-pubblikazzjoni; Responsabbli għall-aspetti kollha tax-xogħol.
Dan ix-xogħol kien appoġġjat mill-Fondazzjoni Nazzjonali tax-Xjenza Naturali taċ-Ċina (81560676 u 81660479), il-proġett tal-ewwel klassi tal-Università ta' Shenzhen (86000000210), il-Fond tal-Kumitat għall-Innovazzjoni fix-Xjenza u t-Teknoloġija ta' Shenzhen (JCYJ20210324093810026), u l-Fond ta' Riċerka fix-Xjenza u t-Teknoloġija Medika tal-Provinċja ta' Guangdong (A2020157 u A2020272), il-Farmaċija tal-Università Medika ta' Guizhou tal-Provinċja ta' Guizhou ffinanzjata mil-Laboratorju Ewlieni (YWZJ2020-01) u l-Isptar ta' Shenzhen tal-Università ta' Peking (JCYJ2018009).
1. Tang B, Zhu J, Zhang B, et al. Potenzjal terapewtiku ta' triptolide bħala aġent anti-infjammatorju f'kolite sperimentali indotta minn dextran sodium sulfate fil-ġrieden. pre-immune. 2020;11:592084. doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Kaplan GG. Il-piż globali tal-IBD: mill-2015 sal-2025. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2015;12:720–727. doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Peng J, Zheng TT, Li Xue, et al. Alkalojdi derivati ​​mill-pjanti: modifikaturi promettenti tal-marda fil-marda infjammatorja tal-musrana. Prepharmacology. 2019;10:351. doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B, et al. Indigo Naturalis jinibixxi l-istress ossidattiv tal-kolon u r-risponsi Th1/Th17 fil-kolite indotta minn DSS fil-ġrieden. Oxid Med Cell Longev. 2019;2019:9480945. doi: 10.1155/2019/9480945
5. Chen M, Ding Y, Tong Z. L-effikaċja u s-sigurtà ta' Sophora flavescens (Sophora flavescens) Mediċina erbali Ċiniża fit-trattament tal-kolite ulċerattiva: evidenza klinika u mekkaniżmi potenzjali.Prepharmacology.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Cao Fang, Liu Jie, Sha Benxing, Pan HF. Prodotti naturali: drogi sperimentalment effettivi għat-trattament tal-marda infjammatorja tal-musrana. Curr Pharmaceuticals. 2019;25:4893–4913. doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Zhang C, Jiang M, Lu A. Riflessjonijiet dwar it-trattament aġġuvanti tal-kolite ulċerattiva bil-mediċina tradizzjonali Ċiniża. Clinical Rev Allergy Immunization. 2013;44:274–283. doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Li Zhongteng, Li Li, Chen TT, et al. L-effikaċja u s-sigurtà tal-granuli Banlangen fit-trattament tal-influwenza staġjonali: protokoll ta' studju għal prova kkontrollata każwali.trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x